tat壳聚糖修饰多壁碳纳米管药物递送系统的研究生物医学工程专业论文.docxVIP

学校代码： 学校代码： 10023 学 号：B2012015003 博士学位论文 TAT／壳聚糖修饰多壁碳纳米管药物递送系统的研究 所 院 生物医学工程研究所 姓 名 董霞 指导教师： 李迎新教授 导师小组： 冷希岗研究员 学科专业： 生物医学工程 研究方向： 生物医学工程 完成日期： 2015年4月 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写 过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢 意。 学位论文作者签名： 榷 签字日期： Ⅺ圹年r月对日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解j壁壶拯塑匡堂瞳有关保存、使用学位论文的管理 办法。有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查 阅和借阅。本人授权j壁塞垃塑匡堂睦可以将学位论文的全部或部分内容编入有关 数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：撇 导师签名： 签字日期：Ⅻ心年f月话日 签字日期： 叼日 学位论文作者毕业后去向： 工作单位：冲I司邑髦降断兄生吻邑妇牵唧甓听 电话：口))。卵鹳们／ 通讯地址：噼韦奸已囱币够呛刮参． 邮编：如／7≯ 万方数据 目录摘要 目录 摘要 。l Abstract ．． ． 3 第一章前言 6 1．1碳纳米管及其功能化 6 1．1．1纳米技术及碳纳米管简介 6 1．】。2碳纳米管的功能化 7 1．2功能化碳纳米管的应用 ．10 1．2．1功能化碳纳米管作为抗癌药物载体 ．10 1．2．2功能化碳纳米管作为基因载体 ．13 1．213功能化碳纳米管作为多肽抗原、蛋白等载体 ．15 1．2．4功能化碳纳米管在肿瘤热疗中的应用 ．16 1．2．5其他应用 ．16 1．3碳纳米管的生物安全性 ．17 1．3．1碳纳米管进入细胞的途径 ．17 1．3．2碳纳米管毒性 ．19 1．3．3影响碳纳米管毒性的因素 ．．20 1．3．4碳纳米管的免疫效应 ．．22 1．4细胞穿膜肽的应用 23 1．4．1细胞穿膜肽的定义 ．23 1．4．2 TAT多肽 23 1．4．3 A佃G多肽 24 1．5课题的提出 24 第二章TAT-壳聚糖修饰多壁碳纳米管的合成与表征 ．26 2．1引言 26 2．2实验部分 26 2．1．1实验材料 ．．26 2．1．2实验设备及耗材 ．．26 2．2实验方法 27 2．2．1 TAT多肽的设计与合成 27 2．2．2TAT多肽修饰壳聚糖共聚物(TAl℃S，TC)的合成 ．27 2．2．3 TC核磁波谱分析 ．28 2．2．4 MWCNTs-TC及MWCNTs．CS的制备 一28 2．2．5 M．Ⅳ10l、m-TC及MWQm．CS透射电子显微镜分析 28 2．2．6 MWC№-TC及MWCNTs．CS核磁波谱分析 28 2．2．7 MWC：卜rrs-TC及MWCNTs．CS红外光谱分析 29 2．2．8 MWCNI．s-TC及MWCNrs．CS拉曼光谱分析 29 万方数据 北京协和医学院博士学位论文2．2．9 北京协和医学院博士学位论文 2．2．9 MWCNTs-TC及MWCNTs．CS热失重分析 29 2．2．10 MWCl、n『s—TC及MWCNTs．CS的Zeta电位分析 ．29 213实验结果 29 2．3．1 TAT多肽表征 ．29 2．3．2核磁波谱分析 一30 2．3．3透射电子显微镜分析 一32 2．3．4红外光谱分析 ．32 2．3．5拉曼光谱分析 ．33 2．3．6热失重分析 ．34 2．3．7 Zeta电位分析 ．．35 2．4讨论 ．36 2．5小结 38 第三章TALT．壳聚糖修饰多壁碳纳米管的体外细胞学研究 39 3．1引言 39 3．2试剂和仪器 39 3．21实验试剂 。39 3．2．3实验试剂配制 ．4l 3．3实验方法 4l 3．3．1碳纳米管溶液的制备 ．41 3．3．2功能化多壁碳纳米管的荧光标记 ．4l 3．3．3 MD—MBA-23l、HUVEC、L929、BEL．7402、L02，R触v264．7细胞的培养 ．41 3．3．4 MWo盯s-TC的细胞毒性检测 一42 3．3．5激光共聚焦成像 ．42 3．3．6通过流式细胞仪检测细胞对碳纳米管的摄入情况 一4