代谢型谷氨酸受体参与脑缺血耐受诱导及其机制探讨神经病学专业论文.docxVIP

—_Ⅷ_—_——Ⅷ_-—_—___————__-——__*_——_____—-—_____-●___————__●———__——一一 —_Ⅷ_—_——Ⅷ_-—_—___————__-——__*_——_____—-—_____-●___————__●———__——一一一一 一—— 主查塑墨 代谢型谷氨黢受体参与脑缺血薅|受诱导及其机制探讨 摘要 谷氨酸受体(glutamate receptors，GluRs)是脑内广泛存在的受体， 可分为离子型帮代谢型两大类。离子型谷氨酸受体毡括NMDA受俸、 AMPA受体、海人藻酸受钵三种亚型。关予代谢型谷氨酸受体 (metabotropic glutamate receptor,mGluRs)，已克隆出8馨申亚型，分别 为mGluRl，mGluR2，mGluR3，mGluR4，mGluR5，mGluR6，mGluR7， mGluR8。根据氨基酸的序列相似性，信号转导机制及激动剂的选择性 不同，可将这些mGluRs分为G．I(mGIuRl／5)、G-II(mGluR2／3) 和O-III(mGluR4／6／7／8)三组。这些受体被其醚体谷氨羧和门冬氨酸 激活箍，：；萋过不圉鳇继腿凌信号传导系统，参与体惑众多靛生理秘瘸 理过程。近年来，这些受体，特别是离子型谷氨酸受体在脑缺血耐受 (brain ischemic tolerance，BIT)诱导中的作用弓l起各国学者的关注， 已发现NMDA受体在一定程度上参与BIT的诱导。但是，关予mGluRs 是否参与BIT诱导尚未见确切报道。国外学者曾在沙土鼠全脑缺血模 型中，运糟免疫组化方法研究发现，G．I组mGluRs在单纯全脑缺血 模型和BIT模型中的表达有微弱差剐，提示mGluRl／5霹能参与BIT 躬诱导，徨趱无其它更确落的实验依据。瑟关予昏鬏组mGluRs是否 参与BIT的诱导，国内钋文献尚未见报道。鉴于mGluRs在脑虎广泛 存在，且类型众多，对神经元可塑性、兴奋性以及细胞膜离子通道(如 钙通道等)功能的广泛影响，有理幽推测其在BIT的诱导中可能发挥 作用。因此，本研究的目的在于确定mGluRs在BIT诱蹲中的作用， 势最终阐确BIT的形成机锖《提供依据。 1 mGluRs参与BIT诱导并影礁GFAP表达 采用大鼠四血管闭塞全脑缺血模型，应用酸堇染色法和免疫组化 Sp法，观察mGluRl／5阻断荆(s)*4一carboxy-3-hydroxy-phenylglycine ((s)一4C3HPG)和mGluR2／3阻断剂。【．methyl．(4-tetrazolyl-phenyl) glycine@m璩)对BIT诱导和胶原纤维酸性蛋白(glial fibfillary acidic 中文摘要protein，GFAP)表达的影响，以确定mGluRs在BIT诱导中的作用。 中文摘要 protein，GFAP)表达的影响，以确定mGluRs在BIT诱导中的作用。 1．1 mGluRl／5阻断剂(s)．4C3HPG参与BIT诱导并影响GFAP表达 将36只永久凝闭椎动脉的Sprague Dawley(SD)大鼠(体重2809～ 3209)随机分为以下四组：①sham组(n-6)：游离双侧颈总动脉，但 不夹闭；②损伤性缺血组(n=6)：夹闭双侧颈总动脉8 min．③脑缺血 预处理(cerebral ischemic preconditioning，CIP)+损伤性缺血组(n-6)： 夹闭双侧颈总动脉3 min，恢复再灌流24 h后再行夹闭8 min；④ (s)．4C3HPG组(n=18)：右侧脑室注射(s)一4C3HPG后20 min行CIP， 恢复再灌流24 h后再行夹闭双侧颈总动脉8 min；依据应用(s)一4C3HPG 的剂量不同，进一步将该组动物分为0．2 mg组(n_6)、0．04 mg组(n_6) 和0．008 mg组(n-6)。夹闭颈总动脉过程中，观察到大鼠瞳孔散大， 脑电波频率变慢，波幅逐渐缩小甚至呈等电位线，证明产生脑缺血。 各组大鼠均在术后或末次缺血再灌后7天灌注取材观察。 硫堇染色显示，sham组海马CAl区锥体细胞可见2～3层，组织 学分级(0级：无神经元死亡；1级：散在的神经元死亡；2级：成片 的神经元死亡：3级：几乎全部神经元死亡。以下同。)为0～1级，神 经元密度(1 rain长度内锥体神经元的个数。以下同)为181士10．5。损 伤性缺血组，海马CAI区锥体细胞稀疏，层次不清楚，有大片缺失， 组织学分级为2～3级，神经元密度为42土6．7，与sham组相比有显著 差异(P．O．05)。CIP+损伤性缺血组海马组织学特征与sham组相似， 表明3 min CIP可对其后间隔1天的8 rain缺血造成的海马CAI区