赛默飞兽药筛查整体解决方案-ThermoFisherScientific.PDF

The world leader in serving science 赛默飞兽药筛查整体解决方案 郭藤 陈冰 彭倩 张婷岚 徐牛生 金琦芸 赛默飞世尔科技（中国）有限公司 关键词: Orbitrap ；Q-Exactive ；兽药筛查；TraceFinder ；HyperSep Retain-PEP ；Accucore RP-MS 前言 目前常见的兽药主要有喹诺酮类、β-受体激动剂类、磺胺类、大环内脂类、激素类、氯霉素类、头孢类、青霉素 类等化合物。过量服用这些药物的畜禽可通过代谢途径进入动物体内，最终通过食物链在人体内蓄积，导致过敏反应和 使人体产生抗药性的副作用，甚至是更严重的危害。相关标准和文献报道的多种类兽药同时分析尚不多见，主要原因一 方面是兽药及其代谢物多达几百种，化学特性差异极大，既有强极性的水溶性化合物又有完全非极性的脂溶性化合物； 另外，肉类样品含有较多的蛋白质(15-25%)、脂肪(5-25%)和磷脂(1-3%)，使得基质非常复杂。开发有效、快速、化合 物通量高的的样品前处理方法便成为实现利用LC-MS/MS对多种类兽药同时筛查和确证的必要前提；同时开发多兽药残留 检测的LC/MS/MS仪器方法也具有相当的挑战性，对仪器的灵敏度、抗基质干扰能力、分辨率等性能均有较高的要求。因 此，亟需一套完整可靠的分析方法对肉类食品中的多种兽药残留进行筛查，以提高食品安全监管水平，保障公众健康和 安全。 HyperSep Retain SPE 小柱是一款经过官能团改性、容量大、纯度高的多孔聚苯乙烯DVB 材料，采用通过式的快速 净化方法，可以清除掉肉类样品中的大部分蛋白质、脂肪及磷脂干扰物，样品前处理过程简单、方便、快速。同时可以 有效地降低质谱分析中的基质效应，使实验数据更加稳定可靠，延长色谱柱寿命，减少仪器维护成本。采用Accucore RP-MS 色谱柱，表面多孔增强核技术的运用，使其具有卓越的峰形、出色的分离速度和分离能力，特别优化后的高柱效和低拖 尾，非常适用于 MS 检测。 Q-Exactive 是赛默飞世尔科技推出的新型高分辨质谱仪，它将高性能四极杆的离子选择与Orbitrap高分辨准确质 量（HR/AM）测量技术相结合，具有高达140000FWHM的分辨率和长期稳定的高质量精度，可获得高质量的一级、二级质 谱图，保证筛查结果的可靠和准确性；并提供各种高分辨扫描功能以适应不同的应用需要。同时具有媲美高端三重四极 杆的定量能力，可轻松定量复杂基质中痕量兽药残留。 本应用旨在解决上述具有挑战性难题，研究开发了一套专门针对动物源食品中常见兽药残留快速筛查和确证的 LC/MS/MS方法。实验选择了猪肉、猪肝、鸡肉、鸭肉、进行实验，并在样品中添加了200多种常见兽药，加标浓度为1.0ug/Kg 和5.0uk/Kg。实验采用酸化乙腈/水进行提取并沉淀蛋白，使用HyperSep Retain-PEP SPE小柱对样品进行快速有效的净 第1 页 The world leader in serving science 化，Accucore RP-MS色谱柱对多种兽药的有效分离，结合高分辨质谱Q-Exactive快速筛查和确证样品中多兽药残留。实 验结果表明，1.0ug/Kg添加浓度在基质中兽药残留检出率均在84%以上，5.0ug/Kg添加浓度在基质中兽药残留检出率均 在92%以上。 1 实验部分 1.1 仪器、试剂与材料 Dionex Ultimate UHPLC3000 超高效液相色谱；Thermo Fisher Scientific Q Exactive 四极杆轨道肼质谱，配ESI源；色 谱柱Thermo Fisher Accucore RP-MS （2.1×100mm, 2.6μm, 17626-102130）。乙腈（色谱纯，Fisher Scientific ）；甲醇（色 谱纯，Fisher Scientific ）；甲酸（色谱纯，Fisher Scientific ）；HyperSep Retain-PEP SPE(60mg/3ml, 60107-203)柱。所用 水均为超纯水。 1.2 实验方法 1.2.1 样品处理 准确称取2.5g