非维生素k依赖的抗凝药对凝血酶生成的影响及维生素k依赖的口服抗凝药起始应用过程中凝血酶生成能力的变化趋势内科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 北京协和医学院中国医学科学院 博士研究生学位论文 PPP platelet poor plasma 乏血小板血浆 PS PT protein S prothrombin time 蛋白 S 凝血酶原时间 PTA pro出rombin time activity 凝血酶原时间活动度 rh-TF recombinant human tissue factor 重组人组织因子 rhs-TM recombinant human soluble 重组人可溶性凝血酶调节蛋白 thrombomodulin RMP sd ery也rocyte-derived microparticles standard deviation 红细胞微颗粒 标准差 TAFI thrombin activated tibrinolysis inhibitor 凝血酶活化纤维蛋白溶解抑制物 TAT thrombin-antithrombin 凝血酶，抗凝血酶(复合物) TG thrombin generation 凝血酶生成 TIA transient ischemic attack 短暂缺血发作 TM thrombomodulin 凝血酶调节蛋白 TRAP Ttpeak thrombin receptor-activating peptide time to peak 凝血酶受体活化肤 达峰时间 VTE venous thromboembolism 静脉血栓栓塞症 4 北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院中国医学科学院 博士研究生学位论文 中文摘要 第一部分达比加群和利伐沙班对组织因子诱导的凝血酶生成和血小板聚集功能的 影响 摘要 目的：达比加群酯和利伐沙班是新近应用于临床的非维生素K依赖的直接凝血酶和 直接因子Xa抑制剂。临床研究已经证明二者的疗效不劣于甚至优于传统的抗凝药 物华法林。由于作用靶点的不同，二者抗凝效应必然存在差异。本研究通过体外血 浆凝血酶生成(TG)和全血血小板聚集率(PAgR)试验评价达比加群和利伐沙班对组 织因子诱导的凝血过程的影响，并探讨凝血酶调节蛋白(n哪在抗凝药物环境下对 TG的调节作用。 方法：枸橼酸钠抗凝管采集健康受试者外周静脉全血，按以下三个方面处理：①分 离乏血小板血浆(PPP)，体外给予递增浓度梯度(0，25，100，400，800 nmol／i)的达比加 群和利伐沙班预处理，应用校正的自动凝血酶生成图(CAT)法检测TG参数，包括延 迟时间(Lagtime)、内源性凝血酶生成能力(ETP)、峰值(Peak)和达峰时Inq(Ttpeak)； ②枸橼酸钠抗凝全血在体外给予上述浓度梯度的达比加群和利伐沙班预处理，动 态血小板计数法检测全血PAgR；③在①基础上加用等量的重组人凝血酶调节蛋白 (rhs．TM，10 nmol／I)，观察TG变化。 结果：①达比加群(0．800 nmol／1)浓度依赖性的延长血浆Lagtime和Ttpeak等时间 参数。低浓度的达比加群(25．100 nmol／1)不降低血浆ETP(1737．6．1904．7 nmol-min) 和Peak(337．7．364．6 nm01)，高浓度的达比加群(100．800 nmol／L)浓度依赖性降低血 浆ETP和Peak。利伐沙班(0．800nmol／1)延长Lagtime和Ttpeak及降低ETP和Peak 均呈浓度依赖性的。以ETP计算，达比加群和利伐沙班的半数最大抑制浓度0c50) 分别为678．1士1．4 nmol／l和460．1+1．4 nmol／I，二者比值约1．47倍。②在空白对照 组，组织因子可诱导784-5％的全血PAgR；达比加群和利伐沙班(0．800nmol／1)均可浓 度依赖性的抑制组织因子诱导的PAgR，IC50分别为l 19．5士1．5和77．5士1．6nmol／l， 二者比值约1．54倍。③rhs．TM不影响Lagtime和Ttpeak，但显著降低ETP和Peak (分别下降22．4％和13．3％)。在rhs．TM环境下，低浓度的达比加群(25 nmol／1)有增 加ETP(1568．97+117．99 vs 1478．65 4-73．77 nmol-min)和Peak(330．82士17．56 299．46 士6．35 nmol／1)的趋势(PO．05)。不同的是，低浓度利伐沙班(25 nmol／)即可显著降低 ETP(748．42+368．97 VS 1478．65+73．77 nmol-min)和Peak(106．534-55．46 VS 299．46 士6．35 nmol／1)(P均0．01)。以ETP计算，达比加群和利伐沙班的IC50分别为 605