蛋白质纳米粒子共振光散射探针的分析植物学专业论文.docxVIP

摘要簧自质是生命有机体麴主要成分，在生命体生长发育豹各个阶段都起着重要作 摘要 簧自质是生命有机体麴主要成分，在生命体生长发育豹各个阶段都起着重要作 用，所以蛋涵质检测技术的发展在生命科学的各个领域越来越重要。随精生命科学对 蛋囱质检测技术要求的提高，已有的蛋囱质检测技术熊扁限性瑟益暴露惑来。所以研 究普遍适用性好、操作简便、灵敏度离的蛋囱质检测新技术显褥越来越追切。 本文以纳米金釉纳米铁(III)为探针，基于纳米粒子在蛋白质模板上的聚集，应用 共振光散射(龇S)技术对蛋毒震纳米粒子共掇光散射探钟进行了研究，建立了离灵 敏度的蛋囱质检测方法。液榴介质中纳米粒子和蛋白质都带有～定量韵正受电荷，在 合适熬条件下通过静电引力相要作用，纳米粒子在蛋幽质模板上聚集。大的聚集体形 成或聚集体中榴邻粒予之阔电子豹偶极。偶摄槌互作震和共轭效应导致体系产生强烈 丽稳定的共振光散射，在～定范圈内共振光散射强度同蛋囱质的浓度成正比。 磺究发现纳米金和纳米铁(111)体系产生不同的共振光散射光谱，当加入少量蛋巍 质后均出现强烈的共振光散射增强现象，其共振光散射峰分别位于531nm和451nm， 并且散射强度与蛋自餍浓度在～定范蠢内具有趣好的线性关系。试验中采用Frens法 制备了不同粒径的金纳米粒子，对予15rim的纳米金，在优化的最镁试验条件下，即 0，01mol／L pH4。56的NaAc。HAc缓冲介质中，测定牛趣清蛋囱BSA的检测限为 难。6ng／mL，线性范围为0．0王～0．30；-tg／mL。焉粒径大予15nm懿金颗粒袭现爨相对比 较差的线性范慝0。02～0。】-0,g／mL，甚至100nm的金颗粒没有观察到共振光散射增强 现象。纳米铁(珏!)在最佳试验条件下，鞠pH7。4的二甲砷酸钠缓冲介质中，BSA测 定的检测隈为6。6ng／mL，线性范匿为0。02--0。70薛g／mL。试验结果表明离予强度(NaCl 浓度)对体系散射强度有着非常明显的负影响，纳米金和纳米铁(m)的临界NaCl浓 度分别为0．02mmol／L、0+10mmol／L。常见的金属离子和氨基酸不干扰测定，金耩离 子韵允许浓度一般为l。0×10’。7礅ol昆，蕊氨基鼗的允许浓度相差比较大，但都蕊予 2．0,g／mE。相同浓度的不同蛋自质(牛盘清囱蛋鑫、人盔清鑫蛋爨、￥一球蛋舞、明 胶)对方法的哦应差舜性不大。将纳米粒子共振光散射搽针应用于人血清总蛋鑫的测 定，著与考马颊焘蓝的方法作比较，褥到了满意的结果。 纳米粒子与蛋囱震之间的作用力主要是静电引力，它们的缝合属予物理吸附过 程，不改变蛋囱质的化学性质，所以有剩于蛋囱质的进一步分析。纳米粒子探针制备 容易，便宜无毒。鉴于其优良的检测性能和实用性，纳米粒子共振光散射探针可能成 为检测纳克级蛋囱震的裔效工具，并为免疫分析及其生物芯片翡检测提供一个操佟篱 便、高灵敏度的技术平台。 美键词：纳米金；缡米铁(蕊)；蛋酝质；共振光散射(弛S)；探针 Study Study on Protein Determination with the Resonance Light Scattering Probes of Nanoparticles Zhang Shu-hong Specialized Subject：Botany Directed by Prof．Li Zheng-ping Abstract The detection of protein becomes increasingly important to many areas of life sciences because proteins are the substantial elements of vital phenomena。As the proteomics project has put forward in recent years，the routine methods are not possible to meet the protein detection in the studies due to their low sensitivities，complicated procedure，expensive instrument or other shortcomings．So it is very urgent to study the protein determination method of high sensitivity,simple operation and universal applicability． By using a resonance light scattering(RLS)technique，the