tmem49在卵巢癌组织中表达的临床意义及对卵巢癌发生及转移中的作用机制妇产科学专业论文.docxVIP

3．实验结果 3．实验结果 1 7 3．1 Western-blot法检测相关蛋白的表达情况 ．．17 3．2实时定量PCR从mRNA水平检测TMEM49及相关基因的表达 18 3．3 下调TMEM49表达可抑制卵巢癌细胞的增值 ．．21 3．4下调TMEM49表达可阻止卵巢癌细胞周期进程 ．．22 3．5干扰TMEM49的表达可促进细胞凋亡 ．．22 3．6干扰TMEM49表达可降低卵巢癌细胞的侵袭及粘附能力 ．．23 4．讨论 ．．：15 5．结论 ．．28 总结．．．． ．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．29 参考文献 ： 30 附录．．．． ．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3：! 致 谢． ．．．．．．． ．．．．．．．． ．．．．．． ． ．．． ．． ．．．．．．．．．． ．．． ．．．． ．．．． ．．．．．．．．3：； 文献综述 。34 作者简历 ．39 III 万方数据 万方数据 万方数据 中文摘要研究目的 中文摘要 研究目的 在中国，卵巢癌是女性前十大常见肿瘤，在女性生殖系统常见恶性肿瘤中发病率位 居第三，死亡率却仅次于宫颈癌。原因是卵巢癌发病隐匿、转移前常无症状，大多数卵 巢癌患者确诊时即处于癌症晚期，错过了最佳的治疗时机。因此，寻找卵巢癌特异性相 关基因，为卵巢癌的诊断和治疗提供新的理论依据，成为卵巢癌早期诊疗的关键。 为此，国内外大量研究致力于寻找卵巢癌相关特异性基因。TMEM(Transmembrane Protein，跨膜蛋白)作为膜蛋白的一部分，参与了细胞的信号传导和增殖分化等，是肿 瘤相关基因研究热点之一。TMEM家族里大部分作为癌基因，女HTMEMl6a、TMEMl7a、TMEMl7b 等，也有作为抑癌基因发挥功能，女HTMEMl00等。 TMEM49在不同肿瘤中的作用已有相关文献报道，但它与卵巢癌之间的关系尚未明 确。本研究以TMEM49作为目标基因，应用免疫组织化学的方法进一步研究其在卵巢癌组 织与正常卵巢组织中的表达情况，探讨其表达的临床意义。并通过RNA干扰技术研究 TMEM49对卵巢癌株系生物学行为的影响，探测其与卵巢癌发生、发展、转移等的相关性， 并揭示其在癌症发生过程中的分子机制及探讨其作为卵巢癌诊断和治疗靶点的可能性。 研究方法 应用免疫组织化学方法检测卵巢癌组织和正常组织各30例的TMEM49的表达情况。分 别采用蛋白免疫印迹方法和实时定量PCR检测5株卵巢癌细胞系中TMEM49蛋白和mRNA水 平的表达，选择高表达的卵巢癌株系构建TMEM49-ShRNA稳定转染的细胞系，通过细胞增 殖实验、流式周期和凋亡实验、细胞侵袭粘附实验等方法分析TMEM49对卵巢癌株系生物 学行为的影响。并通过PCR和Western blot方法检测卵巢癌细胞系中TMEM49基因干扰凋 亡通路Caspase3、Bad、Bax及转移通路MMP2、KLFIO、CXCLl2等的表达差异。 研究结果 1．TMEM49在卵巢癌组织中表达率比正常卵巢组织高，差异具有统计学意义(氏 0．05)； 2．卵巢癌组织中TMEM49的表达与FIGO分期、组织学分级有关(PO．05)。FIGO分 期或组织学等级越高，TMEM49表达阳性率越高； 3．TMEM49 ShRNA下调TMEM49的表达可减慢卵巢癌细胞A2780的增殖速度，阻滞细胞 G1／S期转化，诱导其细胞凋亡，并降低侵袭能力和粘附能力，差异均具有统计学意义(P 1V 万方数据 万方数据 0．05)；4．TMEM49 0．05)； 4．TMEM49 ShRNA可上调凋亡通路的相关基因如Caspase3、Bad、bax的表达，却下 调转移通路MMP2、KLFIO、CXCLl2的