低氧条件下红景天苷对脂多糖诱导的人牙周膜细胞活性氧及炎症因子表达的影响口腔临床医学专业论文.docxVIP

西南医科大学硕士学位论文的DMEM进行1％02低氧连续培养6 西南医科大学硕士学位论文 的DMEM进行1％02低氧连续培养6 h后，收集各组细胞及其上清 液，分别用2’，7’．二氯荧光黄双乙酸盐法(2，7-dichlorodihydrofluorescein diacetate，DCFH．DA)检测各组细胞中的ROS表达水平、反转录酶 一聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction， RT—PCR)和酶联免疫吸附试验(Enzyme—Linked·Immunosorbent Assays，ELISA)检测各组细胞TNF一仅、IL一1p、IL一6 mRNA和蛋白 的表达水平、Western blot法检测A组、B组和10ug／mL LPS+100ug／mL SAL细胞的转录因子．1cB(NF．心)信号通路的磷酸化情况。 研究结果：1、采用改良酶消化组织块贴壁法，在体外能成功获 得原代人牙周膜细胞。2、MTT实验结果显示：本实验最大剂量 100ug／ml的SAL不影响低氧条件下LPS诱导的人牙周膜细胞的增殖 活力(P》0．05)。3、DCFH．DA实验结果显示：与对照组比较，单纯 LPS组人牙周膜细胞内的ROS显著升高(PO．05)；与LPS组比较，3 个SAL实验组人牙周膜细胞内ROS的表达降低(Po．05)，且具有剂 量依赖性。4、RT．PCR和ELISA实验结果显示：和对照组比较，单 纯LPS组人牙周膜细胞的TNF一0【、IL一113矛I IL一6在mRNA和蛋白质 水平的表达显著升高(PO．05)；与单纯LPS组比较，3个SAL实验组 TNF一0t、IL一1t和IL一6在mRNA转录水平和蛋白质水平的表达降低(P 0．05)，且具有剂量依赖性。5、Western blot实验结果显示：和对照组 万方数据 西南医科大学硕士学位论文比较，单纯LPS组人牙周膜细胞的NF．r．B和Ir,Ba的磷酸化水平升高 西南医科大学硕士学位论文 比较，单纯LPS组人牙周膜细胞的NF．r．B和Ir,Ba的磷酸化水平升高 (P0．05)；与单纯LPS组比较，100ug／ml的SAL实验组的人牙周膜 细胞的NF．1(B和IKBa的磷酸化水平降低(P0．05)。 研究结论：1、本实验最大剂量100ug／ml的SAL不影响人牙周 膜细胞的增殖，无毒副作用，是安全的。2、SAL可降低低氧条件下 LPS诱导的人牙周膜细胞的ROS和TNF—Q、IL—lf3、IL一6炎症因子表 达，具有一定的保护人牙周膜细胞的作用。这个保护机制可能是SAL 抑制人牙周膜细胞NF．r．B信号通路的磷酸化。3、SAL可作为高原牙 周病的预防和治疗用药，为高原牙周病提供了一个新的治疗思路。 关键词：红景天苷；人牙周膜细胞；脂多糖；活性氧；炎症细胞 因子；核转录因子 万方数据 西南医科大学硕士学位论文The 西南医科大学硕士学位论文 The effect of salidroside on the expression of reactive oxygen and sS inflammatoryLrg：lammatory cytoldnes。humancytoklnes in tluman periodontal‘igamentoenoaontm ligament Ceils stimulated by lipopolysaccharide under hypoxia Abstract Objective：Periodontitis is a persistent inflammation and immune response caused by pathogens and their metabolic products，especially LPS．It is one of the two major chronic diseases threating human oral health and a major cause of the loosen teeth and teeth loss．The survey of epidemiology shows that the blood in body becomessticky、thick、 gathering and clotting¨，the oxygen concentration in the periodontal tissue becomes more lower，oxidative stress becomes more higher，subgingival bacterial species become more richer，incl