tfap2α在肾透明细胞癌中的表达及对细胞增殖和周期的影响外科学泌尿外科专业论文.docxVIP

解放军医学院硕士学位论文TFAP2伍在肾透明细胞癌中的表达及 解放军医学院硕士学位论文 TFAP2伍在肾透明细胞癌中的表达及 对细胞增殖和周期的影响 中文摘要 背景：肾透明细胞癌临床常见，恶性度较高，尤其是晚期转移性患者，外科手术、 放疗、化疗均不敏感，成为治疗的难点。肾透明细胞癌中存在很多基因突变，近 年来寻找切实有效的分子靶点，开展分子靶向治疗及早期诊断显示出更大的临床 优势。TFAP2a是一种转录因子，在很多肿瘤类型中表达异常，被认为与肿瘤发生 发展机制有着密切关系。但TFAP2a在肾透明细胞癌中的研究报道很少见到。 目的：本实验旨在研究TFAP2cc在人肾透明细胞癌细胞、组织中的表达，探讨肿瘤 组织中TFAP2Q水平与临床资料的相关性：并在肾透明细胞癌细胞系中，通过下调 或上调TFAP2c【的表达，检测其对肿瘤细胞增殖及细胞周期的影响，从而探索 TFAP2Ⅱ在肾透明细胞癌发生发展过程中的生物学意义。 方法：1．PCR及Westem_blot检测肾透明细胞癌细胞系(769．P、Caki．2、786．O、 Caki—l、ACHN、A498、SNl2．PM6)与正常肾小管上皮细胞系(HKC、HK2)中 TFAP2仅的袁达水平差异：免疫组织化学方法检测12例肾透明细胞癌肿瘤组织及 对应瘤旁组织中TFAP2n表达，PCR法检测49例肾透明细胞癌肿瘤组织和相应瘤 旁组织中TFAP2cc表达水平差异，并分析与临床资料的相关性。2．运用RNA干扰 技术，在肾透明细胞癌细胞系786—0中，转染siRNA下调TFAP2Q的表达，检测 786—0细胞增殖及细胞周期的变化。3．构建pLv．EGFP(2A)一TFAP2c【质粒，上调 TFAP2a在肾透明细胞癌细胞系786．0和Cal(i．2的表达，检测786．O、Caki．2细胞 增殖及细胞周期的变化。 结果：1．在细胞系中，肾透明细胞癌较正常肾小管上皮细胞中TFAP2Q的mI州A 水平、蛋白水平均显著降低(尸0．05)。在组织中，免疫组化显示TFAP2cc在胞核 及胞质均有表达，以胞核为主：肿瘤组织中弱表达，对应瘤旁组织中表达相对较 强；肿瘤组织mImA平均表达显著低于瘤旁组织(尸0．05)：TFAP2cc的mRNA 水平在不同性别、年龄、BMI指数、及T分期等组间的表达均无统计学意义(P 0．05)，但与肾透明细胞癌Full埘an分级呈负相关(P0．05)，Fuhrnlall分级越 高，TFAP2旺表达水平越低。2．成功转染siI乇NA—TFAP2c【下调肾透明细胞癌TFAP20I 万方数据 解放军医学院硕士学位论文表达，MTS及平板克隆实验显示下调TFAP2a后细胞增殖率明显增高(P0．05)， 解放军医学院硕士学位论文 表达，MTS及平板克隆实验显示下调TFAP2a后细胞增殖率明显增高(P0．05)， 流式细胞术显示siI酬A组G0／G1期细胞比例显著降低，S期细胞比例显著升高(P O．05)，而G2／M期比例无显著差异(PO．05)，细胞快速进入S期而促进细胞增 殖。3．成功构建pLV-EGFP(2A)．TFAP2a质粒上调肾透明细胞癌TFAP2cc袁达，MTS 及平板克隆实验显示上调TFAP2c【后细胞增殖率明显降低(PO．05)，流式细胞术 显示质粒组G0／Gl期细胞比例显著升高，S期细胞比例均显著降低(P0．05)，而 G2／M期比例无显著差异(尸O．05)，阻滞于G1／S期而抑制细胞增殖。 结论：TFAP20【在肾透明细胞癌中异常低表达，与其恶性分化程度存在相关性： T11AP2Ⅱ影响癌细胞增殖及细胞周期变化，提示可能在肾透明细胞癌的发生发展中 发挥抑癌基因作用。 【关键词】TFAP20c：肾透明细胞癌：细胞增殖：细胞周期 2 万方数据 解放军医学院硕士学位论文Expression 解放军医学院硕士学位论文 Expression of TFAP2伍in Clear Cell Renal Cell Carcinoma and its Influence on Cell Proliferation and CeU Cvcle Abstract Background：Clear ceU renal cell carcinoma(ccRCC)is clinically common with malignant degree，especially in metastatic patients with adVanced stages．Traditional su曜e以radiotherapy aIld chemotller印y are not so e虢ctive，a11d the molecular ta唱et treatnlent sho、ⅣS蓼eater clinical ad