蛋白质组技术筛选与鉴定由重金属盐诱导的海兔大脑神经节差异蛋白质组的研究生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

厦门大学学位论文著作权使用声明本人完全了解厦门大学有关保留、使用学位论文的规定。厦 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人完全了解厦门大学有关保留、使用学位论文的规定。厦 门大学有权保留并向国家主管部门或其指定机构送交论文的纸 质版和电子版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允 许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关 数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密 的学位论文在解密后使用本规定。 砂fp年解密后适用本授权书。 2、不保密() (请在以上相应括号内打“√) 作者签 前：多矿形年阴／oEI 导师签 前：1私年穸月饭日 f凰f4υ UF f凰 f 蛋白质组技术筛选与鉴定南重金属盐诱导的海兔大脑神经节蔗异蛋白质组的研究目 蛋白质组技术筛选与鉴定南重金属盐诱导的海兔大脑神经节蔗异蛋白质组的研究 目 录 中文摘要 7 Abstract 一 · 8 第一章前言 ”lo 一、海兔神经科学研究进展 lO 1．1海兔简介 10 1．2海兔的中枢神经系统 11 1．3海兔神经科学研究进展与意义 13 二、重金属对中枢神经系统的毒理研究 14 2．1重金属概述 14 2．2重金属的毒性机理 15 2．3神经毒理学研究概述 16 2．4三种重金属对神经系统的毒性 17 2．5几种重要的重金属污染生物标志 20 三、蛋白质组学的研究进展 21 3．1蛋白质组的概念 2l 3．2蛋白质组研究的策略和技术路线 22 3．3蛋白质组学研究主要技术手段 23 3．4蛋白质组学研究中的新技术 28 四、蛋白质组学在神经生物学研究中的应用 30 4．1神经结构的蛋白质组学研究 30 4．2神经功能蛋白质组的研究 30 4．3神经系统疾病的蛋白质组学研究 31 4．4神经干细胞的蛋白质组研究 33 4．5蛋白质组学与蛋白质网络 34 五、本论文研究的内容和意义 34 第二章材料与方法 36 一、实验材料 36 蛋白质组技术筛选与鉴定由重金属盐诱导的海兔人脑神经节差异蛋白质组的研究1．1生物材料 蛋白质组技术筛选与鉴定由重金属盐诱导的海兔人脑神经节差异蛋白质组的研究 1．1生物材料 36 1．2常用试剂 36 1．3仪器设备 36 1．4实验用试剂配制 37 二、实验方法 41 2．1实验动物处理 4l 2．2海兔CG中金属含量的测定 4l 2．3海兔CG的超微结构观察 41 2．4样品的制备 41 2．5蛋白含量的测定 42 2．6第一向等电聚焦电泳 42 2．7平衡及第二向SDS．PAGE电泳 42 2．8 IPG．SDS双向电泳 42 2．9凝胶的染色 43 2．10银染后的蛋白质的肽质量指纹鉴定 43 2．11肽质量指纹图谱的分析和数据库检索 45 第三章结果与讨论 46 一、重金属污染对海兔神经系统的影响 46 1．1受污染后NLCS的CG细胞中重金属浓度变化规律 46 1．2重金属诱导后NLCS的CG细胞超微结构 48 一 二、优化海兔∞蛋白质组双向凝胶电泳分离技术 50 ≯ ， 2．1优化样品的制备与处理 52 2．2优化电泳过程 57 2．3凝胶的染色 59 三、重金属盐诱导下海兔CG表达差异蛋白质组 62 3．1镉诱导后海兔CG的差异蛋白质组 65 3．2铜诱导后海兔CG的差异蛋白质组 68 3．3铅诱导后海兔CG的差异蛋白质组 70 3．4结果讨论 73 2 蛋白质组技术筛选与鉴定由重金属盐诱导的海兔人脑神经节謦异蛋白质组的研究第四章小结 蛋白质组技术筛选与鉴定由重金属盐诱导的海兔人脑神经节謦异蛋白质组的研究 第四章小结 79 缩略语表 8l 参考文献 82 致谢 93 ■y ^ 、 ● 3 电，、，f do 电 1．Progress 1．Progress of neuroscience study in Aplysia。 10 1．1 Introduction ofAplysia 10 1．2 Central nervous system of Aplysia。 11 1．3 Signification and status of neuroscience study in Aplysia’ 13 2．Toxicology study of CNS infected by heavy metal 14 2．1 Introduction ofheavy metal 14 2．2 Mechanism of the toxicity of heavy metal 15 2．3 Introduction of neurotoxicology 16 2．4 The toxicity ofthree kinds ofheavy metal 17 2．5 Several biomarkers of pollu