半叶马尾藻多糖对32p玻璃微球肿瘤内照射小鼠的减毒增效作用临床检验诊断学专业论文.docxVIP

学位论文独创性声明本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文 学位论文独创性声明 本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文 中特别加以标柱和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，也不包含为获得广东医学院或其他教育机构的学位或 证书所使用过的材料。 作者签名．驰彳吼埘乡’矿 学位论文知识产权声明 本人在就读研究生期间所完成的学位论文及其相关成果，知识产 权归属学校。本人在毕业离校前会将有关的研究资料和结果全部上交 导师，离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或 成果时，署名单位仍然为广东医学院。学校可以将学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文，可以公布(包括刊登)论文的全部或部 分内容。导师享有发表学位论文、申请成果和专利的权利。 注：保密的学位论文在解密后适用本声明。 作者签名： 缉日期： 型：虚步 2 导师签名：壹丝墨 日期：丛!左：』：少 半叶马尾藻多糖对32P．玻璃微球肿瘤内照射 半叶马尾藻多糖对32P．玻璃微球肿瘤内照射 小鼠的减毒增效作用 中文摘要 【目的】 放射治疗肿瘤已成为各种恶性肿瘤的重要治疗方法，特别是对手术不能切除 的肿瘤更是首选方法。内照射治疗使放射性同位素高度浓集于肿瘤局部，比外照 射治疗给予肿瘤细胞的辐射剂量大，在杀灭肿瘤细胞或减慢肿瘤生长中起到非常 重要的作用。由于制造工艺的改进，32P．玻璃微球稳定性有了很大提高，近几年 在治疗肿瘤中应用日益广泛。但是，32P．玻璃微球在杀死癌细胞的同时，也与其 接触的正常细胞发生作用，对正常机体的免疫功能、造血系统和其它组织产生不 同程度的损伤，使肿瘤患者出现一系列不良反应，导致内放射治疗难以进行。所 以，预防和减轻内放射治疗引起的各种毒副作用，保证内放射治疗的顺利进行， 已成为肿瘤内放射治疗十分重要的课题。半叶马尾藻多糖为天然生理活性物质， 具有毒性小、药源丰富和作用广泛的特点，不仅有提高免疫功能、增强造血能力 和抗肿瘤作用，而且具有清除自由基和减少脂质过氧化的抗辐射功能。本课题选 用半叶马尾藻提取多糖，通过32P一玻璃微球肿瘤内多点注射辐射损伤小鼠模型， 筛选具有减毒增效作用的海藻多糖组份，为开发海藻多糖提供实验资料。 【方法】 1．半叶马尾藻多糖的提取、纯化、分离和鉴定 (1)用水煮醇沉淀法提取半叶马尾藻多糖 (2)蛋白酶联合Sevage法去蛋白纯化半叶马尾藻多糖 (3)凝胶过滤柱层析分离半叶马尾藻纯多糖的不同组份 (4)通过理化实验、凝胶过滤柱层析、紫外光谱扫描、溴化钾压片红外光谱 测定和薄层层析等方法分析多糖的纯度、理化性质、分子结构和单糖组 成。 2．32P一玻璃微球对S1 2．32P一玻璃微球对S1 80荷瘤小鼠免疫功能的影响 (1)小鼠S180实体瘤模型的建立 (2)32P一玻璃微球肿瘤内多点注射辐射损伤小鼠模型的建立 (3)称重法检测32P一玻璃微球对S180肉瘤小鼠的抑瘤率 (4)处死小鼠时，记录其腹水量、腹水性状、腹水瘤密度、脾脏病变和其 他脏器变化。 (5)3H．TdR掺入法检测32P一玻璃微球对S1 80肉瘤小鼠胸腺细胞DNA合成 的影响 (6)脾淋巴细胞转化实验检测32P一玻璃微球对S180肉瘤小鼠淋巴细胞转 化功能的影响 (7)脾细胞增殖法检测脾细胞产生IL．2的能力 (8)酶释放法检测NK细胞杀伤靶细胞的能力 3．半叶马尾藻多糖对32P一玻璃微球肿瘤内照射小鼠的减毒增效作用 (1)3H．TdR掺入法检测辐射损伤小鼠胸腺细胞DNA合成的变化 (2)流式细胞术检Nd,鼠血细胞表面CD3、CD4、CD8的表达 (3)ELISA法检测脾淋巴细胞产生IFN吖和IL．2的能力 (4)酶释放法检测NK细胞杀伤靶细胞的能力 (5)分光光度法检测血清溶血素 【结果】 1．半叶马尾藻多糖的提取和鉴定 对半叶马尾藻采用水煮乙醇沉淀法粗提，蛋白酶联合Scvage法去蛋白，凝 胶过滤柱层析进一步纯化后得到SHP，通过紫外、红外扫描、薄层层析等进行纯 度和结构鉴定及分子量测定。结果表明SHP的提取率为8．56％，总糖含量为 90．96％，提取纯化的半叶马尾藻多糖(SHP)是均一组分，纯度高。含有甘露糖糖 醛酸，平均分子量为4．373x104，并且含有吡喃多糖、木聚糖、半乳糖、阿拉伯 糖、葡萄糖、鼠李糖和果糖等单糖。 2 2．32P．玻璃微球内照射实验对S180肉瘤小鼠免疫功能的影响(1)lxl06个瘤细胞作为肿瘤模型的瘤细胞接种量，小鼠存活时间长，相对 2．32P．玻璃微球内照射实验对S180肉瘤小鼠免疫功能的影响 (1)lxl06个瘤细胞作为肿瘤模型的瘤细胞接种量，小鼠存活时间长，相对 稳定，利于对试验鼠免疫和病理学变化作