伏马菌素b1对小鼠室周器官影响的实验研究病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

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伏马菌素b1对小鼠室周器官影响的实验研究病理学与病理生理学专业论文

河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则, 研究生签名李剁轴师躲唧暂学院领导虢霹习 哆∞西年3月弓/日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名耕I耻导师躲唧奄膏 砂肋8年王月3/日 中文摘要 中文摘要 伏马菌素B,对小鼠室周器官影响的实验研究 摘 要 目的:真菌毒素对脑组织的损伤一直是生物医学界关注 的热点领域,但目前有关伏马菌素Bl(FumonisinsBl,FBl)对脑 室周器官损伤的研究国内外均未见报道。室周器官 (circumventricular organs。CVOs)是位于哺乳动物第三、四 脑室壁上的几个微小器官,包括穹隆下器、正中隆起、终板 血管器、脉络丛、连合下器、松果体后叶及最后区等。其中 的穹窿下器(Subfomical organ,SFO)处缺乏血脑屏障,是 血液中一些分子优先进入脑组织的位点。脉络丛分布于侧脑 室和第四脑室内,脉络丛上皮细胞紧密连接可以防止水溶性 分子扩散进入脑脊液。由于CVOs对外界刺激较其他脑区更 为敏感,是研究真菌毒素对脑组织损伤作用的理想位点。因 此,本实验通过腹腔注射FBl构建实验动物模型,通过扫描 电镜观察FB,对小鼠穹窿下器和脉络丛超微结构的形态学变 化,同时采用免疫组织化学染色方法,观察对穹窿下器和脉 络丛组织中COX.2和HSP70蛋白表达的影响,以期阐明FBl 对CVOs一穹窿下器和脉络丛所产生的有害生物学效应。 方法:1雄性BALB/c小鼠80只,体重1 8一--20 g,由河 北医科大学实验动物部提供。将其随机分为4组,分别为ld 对照组、1d处理组、5d对照组和5d处理组,每组20只。 处理组小鼠给予腹腔注射FBl生理盐水溶解液,终浓度为 2500 lag/kg,终体积为200IJll。ld处理组仅注射1次,5d处 理组连续腹腔注射5天。而ld对照组和5d对照组给予等体 中文摘要积生理盐水腹腔注射,其他处理均与相应处理组相同。每组 中文摘要 积生理盐水腹腔注射,其他处理均与相应处理组相同。每组 抽取5只通过扫描电镜观察FB。对小鼠穹窿下器和脉络丛超 微结构的形态学变化,其余采用免疫组织化学染色方法,观 察FBl对穹窿下器和脉络丛组织中COX.2和HSP70蛋白表 达的影响,并分析其意义。2统计学分析:运用SPSSl3.0 软件,数据采用方差分析。 结果: 1 FBl处理对穹窿下器(SFo)的影响 1.1扫描电镜结果: 1.1.1对照组SFO超微结构特点 1d、5d对照组电镜观察SFO结构正常。主要结构特点 为:低倍镜观察SFO为头尾方向的椭圆形的无纤毛区,其前 后径约400 gm,横径约300 gm,周围为逐渐过度的少纤毛 区。高倍镜下可见中央区的室管膜细胞呈卵石样突入到脑室 腔,细胞呈圆形、六边形或五边形,分界清楚,细胞大小不 一,直径3~10 1.tm。周围区域的室管膜细胞扁平,表面光滑, 室管膜细胞表面可见微绒毛结构。 1.1.2处理组SFO超微结构的变化 FBI处理后1天与对照组比较,电镜观察未发现明显改 变。低倍镜下SFO大体形态无改变。高倍镜下中央区的室管 膜细胞呈卵石样突入到脑室腔,细胞圆形、六边形或五边形 结构清楚。周围区域的室管膜细胞扁平,表面光滑,室管膜 细胞表面可见微绒毛结构。FBl处理5天组,可见SFO细胞 界限不清,表面可见颗粒状物质,周边纤毛出现粘连、倒伏 现象。细胞间连接不清,细胞表面微绒毛粘连、倒伏,细胞 表面火山口样和不规则破损,表面出现颗粒状物质。细胞形 中文摘要态结构边界不清,细胞表面出现类似淤泥状物质。 中文摘要 态结构边界不清,细胞表面出现类似淤泥状物质。 1.2 COX.2蛋白在穹窿下器室管膜细胞中的表达 COX-2蛋白阳性染色呈棕黄色颗粒状,定位于室管膜细 胞胞浆内。1d对照组、5d对照组和ld处理组仅见极少数室 管膜细胞COX.2蛋白呈阳性表达,各组表达率分别为1.15 ±0.25%、2.32±0.31%和5.48±O.76%,两两比较均无明显 差异(pO.05)。而在5d处理组COX.2蛋白阳性细胞数量明 显增多,阳性细胞表达率达52.594 9.08%,显著高

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