供体未成熟树突状细胞对急性血管性排斥反应的影响胸心血管外科专业论文.docxVIP

供体未成熟树突状细胞对急性血管性排斥反应的影响 供体未成熟树突状细胞对急性血管性排斥反应的影响 摘要 供体未成熟树突状细胞对急性皿管性排斥反应的影响 摘 要 目的：利用小鼠至lJ大鼠异种异位心脏移植模型，研究供体未成熟树突状细胞对急 性血管性排斥反应(acute vascular rejection，AVR)的影响，探讨异种心脏移植免疫耐受 机制。 方法：两组体外培养的小鼠骨髓细胞，分别采用常规剂量(GMm)和低剂量(GMl0) GM．CSF诱导，使其分化为树突状细胞(DC)。倒置显微镜观察两组DC(GMmDC 和GMloDC)形态，流式细胞术检测DC表面CDllc、CD86、MHC．II及混合淋巴纽 胞反应实验检测DC对异种T细胞的增殖能力的影响来鉴定DC的纯度及成熟度。 成功获得小鼠骨髓源树突状细胞，行小鼠到大鼠颈部心脏移植。小鼠和SD大鼠 分别作为供受体，随机分为三组，A组(对照组)：仅行小鼠到大鼠颈部心脏移植； B组(GMmDC组)：受体静脉注射GMmDC后第7天行小鼠到大鼠颈部心脏移植；C 组(GMloDC组)：受体静脉注射GMIoDC后第7天行小鼠到大鼠颈部心脏移植。测 定移植前一天各组受体外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例及血清IL．10、TGF．13 l 水平、记录各组移植心脏的存活时间和病理变化。 结果：(1)GM．CSF培养小鼠骨髓前体细胞所得细胞CDl lc阳性率：常规剂量组 为71．944-2．92％，低剂量组为70．464-2．53％，两者无显著性差异(PO．05)。(2)CDllc+ 细胞(DC)表面MHCII、CD86表达：GMhlDC分别为66．474-2．55％、11．434-1．87％， GMloDC分别为59．92+3．50％、0．98+0．56％。GMmDC表面MHCII阳性率较GMl0DC 高表达(PO．05)，GMmDC表面CD86阳性率较GMloDC高(P0．05)。(3)MLR测得 吸光度(optical density，OD)值：GMmDC组为1．14-0．08，GMloDC组为0．604-0．03； 刺激效应：GMmDC组为173．814-10．05％，GM蛔DC组为49．034-5．54％，两组比较有显 著性差异(PO．05)。(4)供心存活时间：A组：1．984-0．51天，B组：1．84-0．57天，C 组：3．24-0．27天，A与B组组间比较P0．05，C组较A组和B组延长(P0．05)。(5) 移植后供心病理：A组、B组、C组呈急性血管排斥反应。(6)大鼠外周血CD4+CD25+ 调节性T细胞比例：A组：2．74-0．57％，B组：2．894-0．81％，‘C组：5．544-1．18％，A 供体未成熟树突状细胞对急性血管性排斥反应的影响 供体未成熟树突状细胞对急性血管性排斥反应的影响 摘 要 与B组比较P0．05，C组较A组和B组高(P0．05)。(7)大鼠血清IL．10、TGF．13 1 水平：A组：18．874-2．69 pg／ml、25．78=1=3．26 pg／ml，B组：20．74士5．36 pg／ml、27．07士5．24 pg／ml，C组：26．12A：4．88 pg／ml、34．00-2=3．80 pg／ml，A与B组比较P0．05，C组较A 组和B组高(P0．05)。 结论：利用GM．CSF诱导培养小鼠骨链前体细胞，能得到足量纯度较高的树突状 细胞。常规剂量组培养所获得的DC(GMhlDC)为成熟DC与未成熟DC的混合体，表 型为CDllc+、MHCIIm、CD86-+；而低剂量组培养所获得的DC(GMl0DC)为较为单一 的未成熟DO，表型为CDl lc+、MHCIll洲、CD86-。GMloDC与GMh‘DC相比，体外 刺激异种T淋巴细胞的增殖能力较弱。静脉注射供者imDC对异种心脏移植受体AVR 有一定的抑制作用，可以延长供心存活时间。这可能与imDC诱导产生CD4+CD25+ 调节性T细胞有关。细胞接触机制和细胞因子可能都参与了CD4+CD25+调节性T细 胞诱导免疫耐受的过程。 关键词：移植；异种；移植物排斥；树突状细胞；急性血管排斥；CD4+CD25+调 节性T细胞 作 者：张胜超 指导老师：沈振亚教授 Effects Effects of Donor lmmatural Dendritic Cell Acute Vascular Rejection ABSTRAC