《SNT1136-2002-水稻茎线虫检疫鉴定方法》.pdfVIP

水稻茎线虫检疫鉴定方法 Methods for quarantine and identification of Ditylenchus angustus (Butler) Filipjev SN ／T 1136— 2002 前 言 本标准的附录B和附录C为规范性附录，附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、南京农业大学。本标准主要起草人：戚龙君、 宋绍秫、林茂松。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 1 范围 本标准规定了对水稻茎线虫检疫和鉴定方法。 本标准适用于稻种以及稻草、稻草编织成的袋、绳、席等包装物中水稻茎线虫的检疫和鉴定。 2 原理 水稻茎线虫Rice stem nematode，学名：Ditylenchus angustus(Butler，1913)Filipjev，属于线虫门 (Nemata)，侧尾腺纲(Secernentea)，垫刃目(Tylenchida)，粒线虫科(Anguinidae)，茎线虫属 (Ditylenchus)。其外寄生于水稻，生殖只能在稻株内进行，主要寄居于花梗的基部、茎杆末节以上以及颖片之 内，这些地方大多有包括卵到成虫各个阶段的大量线虫。水稻受害后叶面出现浅绿色斑点，叶缘卷缩，叶尖弯 曲，整张叶片扭曲或呈畸形，严重时花穗捻转或包在叶鞘内不能抽出，小穗不孕，形成空粒。 本病主要由稻种内潜伏的线虫作远距离传播，通过引种传带到新稻区，还可通过罹病的稻草作远距离传 播。土壤中残留的线虫以及带线虫的病稻草、稻茬、种子或混在种子里的病残碎片为当地次年发病的主要来 源。它的侵染循环、传播途径、寄主范围(参见附录A)、生物学和形态学特征是该检疫鉴定方法的依据。 3 仪器、用具 3.1 生物显微镜(100倍～1 000倍，具有目镜测微尺或者绘图仪、监视器等)； 3.2 体视显微镜(10倍～90倍，具透射光源)； 3.3 冰箱； 3.4 凹玻片； 3.5 试管； 3.6 载玻片； 3.7 盖玻片； 3.8 加热板(80℃以下)； 3.9 烧杯(500 mL、1 000 mL)； 3.10 漏斗； 3.11 漏斗架； 3.12 研钵； 3.13 培养皿； 3.14 剪刀； 3.15 挑针； 3.16 干燥器； 3.17 打空器； 3.18 酒精灯； 3.19 乳胶管； 3.20 纱布； 3.21 止水夹； 3.22 指形管； 3.23 玻璃纤维丝(3 mm～5 mm)。 4 药品 4.1 指甲油； 4.2 TAF固定液(40％甲醛7 mL、三乙醇胺2 mL和蒸馏水91 mL混合而成)； 4.3 乳酚油(苯酚20 mL、乳酸20 mL、甘油40 mL和蒸馏水20 mL混合而成)； 4.4 石蜡。 5 现场检疫 5.1 抽样 5.1.1 抽样方法 棋盘式、五点式或随机抽样。 5.1.2 抽样数量 5.1.2.1 稻种 按总件数的5％～20％抽样，最低抽检10件。取样的数量为：10 kg以下取2 kg；11 kg～100 kg取4 kg； 101 kg～500 kg取6 kg；501 kg～1 000 kg取8 kg：1 001 kg～2 000 kg取10 kg：2 001 kg～5 000 kg取12 kg；5 001 kg～10 000 kg取14 kg：10 001 kg～100 000 kg每增加5 000 kg增取2 kg，不足5 000 kg余量计取 2 kg；100 001 kg以上，每增加50 000 kg增取2 kg，不足50 000 kg余量计取2 kg。 5.1.2.2 稻草及其编织品 按总件数的5％～20％抽样，每次检查不得少于10件且不少于500根。取样的数量为：50根以下取五根：51 根～200根取10根；201根～1 000根取15根；1 001根～5 000根取20根；5 001根以上，每增加5 000根增取五根 样品，不足5 000根的余量计取五根样品。 5.2 外观症状的检查 5.2.1 水稻种子的检查 首先要注意检查褐色畸形种子，其次要看稻种内是否混有稻草或其他水稻残体，同时注意是否夹带泥土 等，收集后与采集的样品一并送实验室进行检查。 5.2.2 稻草及其编