产乙偶姻的海洋枯草芽孢杆菌的发酵性能研究微生物学专业论文.docxVIP

硕士学位论文产乙偶姻的海洋枯草芽孢杆菌的发酵性能研究 硕士学位论文 产乙偶姻的海洋枯草芽孢杆菌的发酵性能研究 Studies on fermentation performance of a marine Bacillus subtilis strain for acetoin production 学 号：完成日期： 呈Q!墨!Q墨 大连理工大学 Dalian University of Technolog 万方数据 lllI lllI M k Ll l l l U 11 11 11 11I Y2820644．．—— 大连理工大学学位论文独创性声明 作者郑重声明o．所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究 工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外， 本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请 学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献 均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。 若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。 学位论文题目： 童互堡蛔鱼卤姿挞孽益至翌坚耋垒兰竺篁!!：兰笪圣主窒。 作者签名： 篮翌堇 日期：—虹年』一月j三日 万方数据 大连理工大学硕士学位论文摘 大连理工大学硕士学位论文 摘 要 枯草芽孢杆菌是被食品药品管理局认为安全的菌株，同时也是农业部允许作为饲料 添加剂的两种芽孢杆菌之一，具有易培养、繁殖快、易保存、对环境适应强、无毒无污 染等特点，近年来在工业生物领域、生物防治领域、动物生产领域、微污染水体净化方 面都发挥了很大的作用。乙偶姻作为一种平台化合物，在日化食品行业、制药工业、化 学工业、烟草行业、涂料工业及农业等多种行业有广泛应用前景。甘蔗糖蜜是制糖过程 中产生的副产品，含有丰富的营养物质，是发酵行业的廉价原材料。本论文针对课题组 筛选得到的一株产乙偶姻的海洋枯草芽孢杆菌DL01的发酵性能进行了研究，并对乙偶 姻的分离和菌种诱变进行了探索。 首先，考察了营养组分和初始条件对枯草芽孢杆菌生长和代谢的影响，包括二价金 属离子、氮源种类及浓度、初始糖浓度和初始pH等。研究发现最适合的氮源是 (NH4)2HP04，金属离子为Mn2+，该菌株在由糖蜜、(NH4)2HP04和MnS04的简单培养 基中生长良好。当初始糖浓度为1809／L、初始pH 6．5时，摇瓶培养72 h，D一乙偶姻浓 度达52 g／L。 其次，考察了枯草芽孢杆菌在不同供氧情况下的代谢情况，包括恒定转速和通气、 恒定转速阶段性增加通气、恒定通气分阶段增加转速，最后确定最适宜的供氧条件为通 气量O．4 vvm、分阶段提升转速(0 h一6 h 200 rpm、6 h一24 h 300 rpm、24 h一72 h 400 rpm)。 在此条件下，200 g／L糖蜜发酵乙偶姻浓度可达61．15∥L，其中D一乙偶姻58．2∥L，转 化率为0．35∥g糖蜜，生产强度0．80 g／0．h)；210 g／L葡萄糖发酵乙偶姻浓度可达76．04 g／L， 其中D．乙偶姻60．91 g／L，转化率为0．42 g／g，生产强度1．00 g／0．h)。 再次，采用盐析萃取的方法对糖蜜发酵液中乙偶姻进行分离，对三种盐析萃取体系 进行比较，发现乙醇／K2HP04效果较好，当发酵液与乙醇体积比为2：1、与K2HP04体积 质量比为4：3时，回收率达96．7％，色素去除率达94．5％。 最后，采用紫外线．LiCl复合诱变与低温等离子体．LiCl两阶段复合诱变的方式对菌 种进行诱变筛选出的一株乙偶姻产量高于原始菌株21％的诱变菌株。 关键词：枯草芽孢杆菌；乙偶姻；供氧；甘蔗糖蜜；盐析萃取 万方数据 产乙偶姻的海洋枯草芽孢杆菌的发酵性畿研究Studies 产乙偶姻的海洋枯草芽孢杆菌的发酵性畿研究 Studies on fermentation performance of a marine Bacillus subtilis strain for acetoin production Ab stract Bacillus subtilis is generally recogonized as safe by the Food and Drug Administration， and has been allowed to be used as feed additives by Agriculture Ministry,with characteristics of easy cultivation，fast growth，easy preservation，high adaptablility,non—toxic and non—pollution．In recent year