《SNT1162-2002-传染性胰脏坏死病毒(IPNV)酶链免疫吸附试验(ELISA)诊断方法》.pdfVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1162-2002 传染性胰脏坏死病毒(IPNV) 酶链免疫吸附试验(ELISA)诊断方法 Testmethodofenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA) forinfectiouspancreaticnecrosisvirus(IPNV) 2002一11一25发布 2003一05一01实施 中 华 人 民 共 和 国家质 量 监督 检 验 检 疫 总 局 SIN/T 1162-2002 前 言 本标准是在参考国际上通用的检测规程和总结我国在这一领域的实践经验的墓础上制定的，作为 对1996年发布的GB/T15805.1-1995《淡水鱼类检疫方法 第一部分》的一个补充。 鉴于目前ELISA快速检测技术已经成熟，具有灵敏、准确、快速的优点，制定此标准有极强的实用 性，对已有的国家标准能起到一个补充作用。 本标准的附录A是资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:江育林、刘登,高隆英、史秀杰。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T1162-2002 传染性胰脏坏死病毒(IPNV) 酶链免疫吸附试验(ELISA)诊断方法 ， 范围 本标准规定了用酶联免疫吸附试验检侧IPN病毒的方法。 本标准适用于IPN病毒的分离及病毒抗原的鉴定，及本病的流行病学调查、诊断、检疫和监侧。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单 不‘包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是 否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准. GB/T6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法(eqvISO3696:1987) GB18088-2000 出人境动物检疫采样 3 试荆和材料 3.1 水 应符合GB/T6682-1992中二级水的规格。 3.2IPN-sp病毒 3.3 阴性对照 正常细胞组织悬液(自备)。 3.4IPN-sp病毒标准抗血清 3.5酶标羊抗免IgG 4 器材和设备 月 月 ， ﹃ ， 1 96孔细胞培养板。 ‘ ， q 尸 J 酶标板。 d q . : J 酶标测定仪。 月 月 q 叼 微量移液器等。 月 仄 勺 ， J 倒置显微镜。 月 产 q ‘ 0 恒温培养箱。 d 7 了 . ， 普通冰箱和低温冰箱。 皿 月 . 八 匕 . 组织研磨器。 月 0 ﹃ - 司 离心机和离心管。 ‘ d IPN病毒的分离 51 采样 对有临床症状的鱼，体长小于等于4cm的鱼苗取整条，体长4cm^6cm的鱼苗取内脏(包括肾); 1 SN/T 1162-2002 体长大于6cm的鱼则取肝、肾、脾。对无症状的鱼取肝、肾、脾;成熟雌鱼还需取卵巢液;按GB18088- 2000采样。 5.2 样品处理 应在10℃以下进行。先用组织研磨器将样品匀浆。再用培养液(见附录A.1)按1，10的最终稀释 度悬浮。在匀浆前未用抗菌素处理过的样品，则须