e选择素和细胞间粘附分子1反义寡核苷酸对人脐静脉内皮细胞与单核细胞粘附功能的影响免疫学专业论文.docxVIP

MCP-1 MCP-1 monocyte chemoattractant protein一1单核细胞趋化蛋白一1 PDGF——A platelet——derived growth factor A MAPK mitogen—’activated protein kinase ATIR angiotensin II type 1 receptor 血管紧张素II 1型受体 Hepes 4一(2-hydroxyerhyl)piperazine—l—erhanesulfonic acid 4一羟乙基哌嗪乙磺酸 CD cluster of differentiation 分化抗原簇 PE R—phycoerythrin 藻红蛋白 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 PC5 R—phycoerythri n—Cy5 藻红蛋白偶联物 OD optical density 光密度 NF-K B nuclear factor——K B 核因子一K B 2 学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明 学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行 研究工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何 其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡 献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法 律结果由本人承担。 作者签名(手写)： 导师签名(手写)： 阳台年莎月污日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查 阅和借阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入 有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本 学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 作者签名。手写，：—乏垒墨∑ 导师签名。手写，： 煎争上月 f弓日 E一选择素和细胞间粘附分子一1反义寡核苷酸 E一选择素和细胞间粘附分子一1反义寡核苷酸 对人脐静脉内皮细胞与外周血单个核细胞粘附功能的影响 摘 要 目的： 探讨E一选择素(E—selectin)和细胞间粘附分子一1(ICAM一1)反义 寡核苷酸(asODN)及其与辛伐他汀(simvastatin)联合应用对人脐静脉内皮细 胞(HUVEC)ICAM-I和E-selectin表达的抑制和对外周血单个核细胞粘附的影 响。 方法：原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，并传代；应用脂质体转染法将 人工合成E—selectin asODN和ICAbi一1 asODN分别导入HUVECs；实验共分8组， 分别为空白对照 (basal)组、TNF—Q诱导组、liposome对照组、 1 i posome—contr01 asODN组、裸asODN(nude asODN)组、脂质体asODN (1ipo-asODN)组、simvastatin处理组、1ipo-asODN与simvastatin联合组， 除空白组外，其余7组均以TNF一Ⅱ诱导内皮损伤；以流式细胞技术测定HUVECs 细胞膜E-selectin和ICAM-I蛋白的表达；以RT-PCR半定量技术测定HUVECs E-selectin mRNA和ICAM-I mRNA的表达；以细胞粘附试验测定HUVECs与单个 核细胞的粘附率；应用辛伐他汀预先处理HUVECs，再用E—selectin 1 ipo—asODN 和ICAM—l lipo—asODN转染HUVECs，观察E—selectin asODN和ICAM一1 asODN 与辛伐他汀联合应用对HUVECs E-selectin和ICAM一1的表达以及对HUVECs与 外周血单个核细胞粘附抑制的影响。 结果：(1)与TNF—Q诱导组相比，E-selectin asODN和ICAM-I asODN以及 E-selectin 1ipo—asODN和ICAM-I 1ipo-asODN均明显降低了HUVECs相应的 E-selectin和ICAM-I蛋白及mRNA的表达(PO．01)；(2)E—selectin asODN和 ICAM-I lipo—asODN与simvastatin联合应用可降低对HUVECs相应的E—selectin 和ICAM-I的蛋白及mRNA表达；(3)1ipo-asODN与simvastatin联合组与 1ipo-asODN组比较，E-selectin表达水平显著下降(PO．01)，