板蓝根根腐病病原菌鉴定及抑菌中草药提取物的筛选植物病理学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 近年来，板蓝根根腐病在一些产区发生逐年加重，成为板蓝根生产的限制因素 之一．本文以板蓝根根腐病为研究对象，进行了病原菌的分离、致病性测定、种类 鉴定、生物学特性研究以及抑菌中草药提取物的筛选试验。 分别于2005年7月和2006年7月，从河北省唐山地区共采集108个板蓝根根 腐病样品，分离获得172株分离物。按照柯赫氏法则，经形态学鉴定分别属于2属 3个种：茄腐镰刀菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和禾谷 丝核菌(Rhizoctonia cerea船)．三者的分离频率依次为48．8％，44．2％和7％。 为了进一步确定病原菌的分类地位，本研究对菌株Pl、P2、P4和P5进行了ITS 序列分析。结果表明：菌株Pl与GenBank中尖孢镰刀菌(DQ459007)的同源性为 1000,4，I2与禾谷丝核菌(AJ242887)同源性为100％，P4与茄腐镰刀菌(AY310442) 的同源性为99％，P5与茄腐镰刀菌(AJ608989)的同源性为100％。 对Pl、P2、P4和P5供试4个菌株在不同温度、pH值、碳源，氮源、相对湿度 条件下的菌落生长、产孢量、孢子萌发以及致死温度研究的结果表明，菌株Pl在 PDA培养基上菌落生长、产孢量和孢子萌发最适温度均为25℃，菌落生长和分生 孢子萌发最适pH值均为6，产孢最适pH值为5。最适碳源为蔗糖，最适氮源为硝 酸钠，在相对湿度低于90％时孢子不萌发，分生孢子致死温度为55℃．菌株P2在 PDA培养基上最适生长温度为30℃，在pH值为6时生长速度最快，最适碳源为淀 粉，最适氮源为硝酸钠。菌株P4、P5在PDA培养基上菌落生长和产孢最适温度均 为30℃，孢子萌发最适温度为25℃，菌落生长、产孢和分生孢子萌发最适pH值均 为7，最适碳源为乳糖．最适氮源为硝酸钠，相对湿度低于90％孢子不萌发，分生 孢子致死温度为50℃． 以菌株P4为靶标菌，测试了123种中草药提取物对菌落生长及分生孢子萌发的 抑制作用．结果表明，提取物浓度为10mg／mL时，有99种提取物对菌落生长具有 显著的抑制作用，其中TS．10、TS-42和TS．84的抑制率均大于50％，而且TS-10 的抑制率达到了100％；有112种提取物对分生孢子萌发具有显著的抑制作用，其 中10种提取物的抑制率在50％以上，而且Ts．10和Ts．1l的抑制率达到100％。将 抑制率大于50％的lO种提取物稀释为5 mg／mL，进行二次筛选，发现Ts-42和TS-84 两种提取物对菌落生长的抑制作用下降，而TS．10对菌落生长抑制率仍为100％， 对分生孢子萌发抑制率为为74．50％。Ts．10的抑制中浓度(ECso)为3．621 mg／mL． 关键词：板蓝根；根腐病；病原菌鉴定；内转录间隔区；生物学特性；中草药提取 物 Identification Identification of Pathogens Causing Root Rot oflsatis indlgotlca and Screening of Antifungal Chinese Herbs Against the Pathogens Author：．Ma Jing-jing lo．aj虻Plant Pathology Sepervise￡．Prof．Zhu Jie-hua Prof．Jiang Ji-zhi Associate-prof．Wang She-tong Abetract Root rot of／sa出indigotica was found to be more and more severity in many areas of Northern China in recent years．h this study,the pathogens were isolated and tested for the pathogenicity,then the pathogens were identified,the biological characteristics of the pathogens WCre examined afterward,and finally ethanol exUact of 123 Species Chinese herbs were tested for the antifungal activity against the isolate P4． One hundred and eight diseased samples of／．indigotica with root rot symptom were collectedfromYufian count