《SNT1161-2002-衣原体感染检测方法补体结合试验》.pdfVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1161-2002 衣原体感染检测方法 补体结合试验 Protocolofcomplementfixation-Testforchlamydiainfection 2002一11一25发布 2003一05一01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总 局 SN/T 1161-2002 前 言 本标准的附录A、附录B,附录C、附录D,附录E均为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位;中华人民共和国湖北出人境检验检疫局、湖北省农业科学院畜牧兽医研究所。 本标准主要起草人:徐涤平、黄晨、刘泽文、陈平、段正赢、颜小平、陈建军、杨宜生， sx/T 1161-2002 衣原体感染检测方法 补体结合试验 范围 本标准规定的补体结合试验(CF)包括直接补体结合试验(DirectComplementFixationTest, DCF)和间接补体结合试验(IndirectComplementFixationTest,ICF), DCF适用于猪以外的哺乳动物和鹦鹉、鸽(三年龄以上老鸽除外)、火鸡衣原体病的检疫和诊断。 ICF适用于其他禽鸟和猪衣原体病的检疫和诊断。 2 材料准备 2.1 器材:12tornX37mm.试管、试管架、水浴箱、U型微量反应板((8X12孔)。 2.2 补体:由官方认可单位供应，按说明书使用和保存。试验前须对补体进行效价滴定。滴定方法见附 录A, 2.3 溶血素:由官方认可单位供应。试验前须对溶血素进行效价滴定，以后每隔2个一3个月测定效价 一次。滴定方法见附录Be 2.4 100绵羊红细胞悬液:制备方法见附录C, 2.5 敏化红细胞:制备及使用方法见附录A, 被检血清:按常规方法采血，分离血清，要求不溶血、无腐败，在血清中加人 。01%硫柳汞或 。.I% 2.6 叠氮钠防腐，试验前需灭能。不同动物血清灭能的温度和时间见附录D. 了 抗原和标准阳性血清、指示血清、阴性血清:由官方认可单位供应，按说明书使用。抗原和阳性血清 效价滴定的方法见附录E, 3 操作方法 3.1 直接补体结合试验 3.1.1 试管法 按表I的程序操作。试验要同时设抗补体对照、阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对 照、溶血素对照和生理盐水对照。 表飞 直接补体结合试验 试〔管法) 单位为毫升 sN/T1161-2002 表 1(续) 单位 为毫 升 被检血清 各项对照 成分 试验管 抗补体 阳性 阴性 抗原 溶 生理 效价 对照 血清 血清 对照 血索 盐水 I :4 1:8 1+16 1:32 1:64 1:128 l :4 2工作量 1-4 2工作量 混匀，4`C16h-18h感作，取出后 37C水浴30min 敏化 0.2 0.2