当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及enosmrna表达的影响中西医结合临床心血管专业论文.docxVIP

当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及eNOSmRNA表达的影响缩略词表 当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及eNOSmRNA表达的影响 缩略词表 缩略词 英文全称 中文名称 AS Atherosclerosis 动脉粥样硬化 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EB Ethidium bromide 溴化乙锭 ED Endothelial Dysfunction 内皮功能障碍 eNOS Endothelial Nitric Oxide Synthase 内皮型一氧化氮合酶 FBS fetal bovine seIum 胎牛血清 FCM flow cytometry 流式细胞术 FR Free radical 自由基 H202 Hydrogen peroxide 过氧化氢 HUVECs human umbilical vein endothelial cells 人脐静脉内皮细胞 MDA Malonaldehyde 丙二醛 MTr 3-(4，5一dimethylthiazol-2-y1)一2，5-diPhenyl-te四氮唑蓝 truroe tetrazdiumBromide PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PUFA polyunsaturated fatty acid 多不饱和脂肪酸 RT-PCR Reverse transcription-polymerase chain逆转录聚合酶链反应 reaction SOD Superoxide Dismutase 超氧化物歧化酶 硎 thlobarblturicaeid 硫代巴比妥酸 tris tris·(hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 UF ultra．filtration 超滤 4 独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 得的研究成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、 观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包含任何 其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本研究做出贡献的个人 和集体均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。 论文作者签名渤乓 ?包 签字日期：加，g年多一月z 6日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解甘肃中医学院有关保留、使用学位论文的规 定，本人同意学院保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子 版，允许论文被查阅和借阅。本人授权甘肃中医学院可以将学位论文的全 部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保存、汇 编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：曩匙毒缈乙声字日期：砂，尸年厂月2 6日 导师签名： 名癌孚≥ 签字日期：砌年，月∥日 当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及eNOSmRNA表达的影响中文摘要 当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及eNOSmRNA表达的影响 中文摘要 目的：观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(H202)损伤人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的保护作用和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因在此过程中的作用，探讨其在 心脑血管疾病治疗中的机制。 方法：用0．5mmol／L H202制造HUVEC损伤模型；按分组把不同浓度(O．59／L、1．0 g／L、 2．09／L)，不同分子量(2万分子量，5万分子量，10万分子量)的当归红芪超滤膜提取 物于损伤后加入，分别测定细胞活3b(MTr法)观察归红芪超滤膜提取物对H202损伤内皮 细胞活性的影响； 黄嘌呤氧化酶法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)，活力硫代巴比 妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量；流式细胞仪分析细胞周期，细胞 内Ca2+含量。半定量逆转录．聚合酶连(RT-PCR)法检测eNOSmRNA表达的变化。 结果：1．0．5mmol／L过氧化氢作用于人脐静脉内皮细胞后，SOD活力降低，MDA活 力升高，Go／G1期细胞的数目明显增加，S期细胞的数目明显减少；细胞内Ca2+含量明 显增加(P0．01)：细胞凋亡增加(P0．01)；eNOS基因在转录水平出现表达降低(P 0．01，P0．05)。2．当归红芪超滤膜提取物对H202损伤内皮细胞作用后，SOD活力 升高，MDA活力降低降低，Go／G1期细胞的数目明显减少，S期细胞的数目明显增加； 细胞内Ca2+含量明显减少(P0．01)。细胞凋亡降低(P0．01)；eNOS基因在转录水 平出现表达增加(P0．01，P0．05)。