钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究海洋生物学专业论文.docxVIP

钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘸作用的研究钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究 钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘸作用的研究 钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究 摘要 本文报道了钝顶螺旋藻多糖(PSP)抗病毒作用的研究以及抗肿瘤作用的 研究。以改良的三氯乙酸法进行提取，所得产品多糖质量含量达92％以上，优 于传统的Sevag法。抗病毒作用的研究选用单纯疱疹病毒l型(HSV一1)标准 株(SM44)，体外实验在Vero细胞中进行，在证实PSP抗HSV一1活性优于目 前临床治疗该病毒感染的首选药物阿昔洛韦的基础上，进一步探讨了PSP抗 HSV一1作用的机制。以不同剂量的PSP作用于病毒复制周期的各个阶段，以病 毒半数感染量(TCID50)，细胞病变(CPE)，蚀斑形成单位(PFU)，MTT法 及核酸分子杂交作为评价指标，结果表明，PSP抗HSV—l作用的机制与阻滞 病毒向细胞吸附，抑制感染细胞病毒的复制和抑制HSV一1糖蛋白gG基因的 转录有关。体内实验以PSP治疗小鼠HSV-1感染，结果PSP治疗组小鼠的存 活率明显高于对照组。同时进行了PSP抗肿瘤作用的研究，体外实验以MTT 法铡定PSP对肿瘤细胞增殖的抑制作用，光镜观察及流式细胞术检测PSP诱 导的HeLa细胞凋亡，首次发现PSP可明显抑制HeLa细胞的增殖，使HeLa 细胞发生GI期阻滞并诱导HeLa细胞凋亡：PSP不仅可抑制HepG-2细胞的增 殖，而且可抑制HepG一2细胞中IGF-2 mRNA的表达；PSP对体外培养的胃肠 道癌细胞亦有明显的抑制作用。体内实验观察PSP对小鼠S-180肉瘤的抑制 作用，PSP在50～200 mg／kg的剂量范围对小鼠S-180肉瘤，均有～定的抑制 作用。本研究还采用真核基因表达技术，构建了HSV一1绿色荧光蛋白报告基 因表达体系，结果不仅提示PSP抗HSV-1的机制可能与抑制HSV～1启动子 ICP6活性有关，同时将为抗病毒药物的筛选提供一种简便、直观、快速、敏 感的方法。 关键词：钝顶螺旋藻多糖；提取：抗病毒作用；抗肿瘤作用；绿色荧光蛋白 钝顶蝶旋藻多糖抗嫡毒及抗肿痛作用的研究Investigation 钝顶蝶旋藻多糖抗嫡毒及抗肿痛作用的研究 Investigation on the antiviral and anticancer activities of polysaccharides from Spirulina platensis Abstract In this paper,the antiviral and anticancer activities of polysaccharides from 印irulina platensis(PSP)were reported．A modified TCA(trichloroacetic acid) method for extraction of PSP was conducted in our experiment，and the purity of the polysaccharides reaches tO 92％．This method is more convenient．rapid and economical than the traditional Sevag method．A standard strain of herpes simplex virus type I(HSV-1，SM44 strain)was used to investigate the antiviral activities of PSP in vitro and in vivo．In vitro experiments were carded out in Vero cells，firstly the activity of PSP against HSV-1 was proved tO be better than acidovir,which iS the most widely used antiviral agent in clinic．Then various concen仕ations of PSP were applied to different steps of HSV一1 replication cycle．virus infectivity (TCID50)，cytopathic effect(CPE)，plaque forming unit(PFU)，methyl thiazolyl tetrazolium(M1。r)method and in situ hybridization were used for estimating the influence