非抗性筛选生长抑素dna疫苗免疫育肥猪的临床试验效果和安全性研究动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

分类号华中农业大学硕士学位论文 分类号 华中农业大学硕士学位论文 非抗性筛选生长抑素DNA疫苗免疫育肥猪的临床试验效果和 安全性研究 The Study of Clinical Efficacy and Safety of Somatostatin DNA Vaccine without Antibiotic Resistance Gene Immunized against Fattening Pigs 研 究 生： 石昭意 学 号： 2012302110009 指导教师： 杨利国教授 指导小组： 张淑君教授 杨利国教授 霍立军教授 李翔副教授 熊家军副教授 梁爱心副教授 专业：动物遗传育种与繁殖 研究方向：动物生殖生理与生物技术 获得学位名称：农学硕士 获得学位时间：2015年6月 华中农业大学动物科技学院 农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 二。一五年六月 万方数据 本课题由现代农业产业技术体系(CARS．3 本课题由现代农业产业技术体系(CARS．3 7．04B)资助 This study was supported by the Earmarked Fund for Modern Agriculture Industry Technology Research System(CARS-—3 7·—04B) 万方数据 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 √ 是否保密 ．侈 如需保密，解密时间 年 月 目 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下述行的研究王作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文孛特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 丽使用过的材辩，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意． 研究生签名：石溺逢、 时阀： p步年名月p器 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规j 校要求提交学位论文的印剥本和电子舨本；学校有权保存提交论 并提供目录检索和阕览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复《 论文．本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发曩 部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献予 本人保留在其他媒体发表论文的权力． 注：保密学位论文(瘁涉及技术秘密、商业秘密或申请专枣I等j{ 文)在解密后适用于本授权书． 学雠文作者鲐万最穗、剥帚鲐粕刎 ，闲 签名日期：7·心年占月p目 签名日期Z∥t厂年多 羚l D B 注：请将=专；=表直接装订在学位论文的靡页和秘泶之问 万方数据 非抗性筛选生长抑素DNA疫苗免疫育肥猪的临床试验效果和安全性及作用机制研究目 非抗性筛选生长抑素DNA疫苗免疫育肥猪的临床试验效果和安全性及作用机制研究 目 录 摘 要 ．．i Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．iii 缩略词表 ．v l文献综述 ．1 1．1生长抑素基因疫苗的研究进展 1 1．1．1单拷贝基因 1 1．1．2双拷贝基因 2 1．1．3非抗性筛选双拷贝质粒 2 1．1．4生长抑素载体的研究 3 1．2生长抑素基因疫苗对动物生长性能方面等影响。 3 1．2．1对小动物的促生长影响 3 1．2．2对畜禽生长性能的影Ⅱ向 4 1．3育肥猪性能测定的关键技术 5 1．4生长抑素基因疫苗免疫程序的优化 6 1．4．1口腔免疫 6 ～1．4．2鼻腔免疫 7 1．4．3免疫剂量 8 1．4．4加免次数 8 1．5安全性研究 9 1．5．1基因整合 一 一9 1．5．2基因免疫对受试动物的影响 ．．10 1．5．3环境的安全性研究 ．．10 1．6研究目的和意义 ．10 2材料 ．．1l 2．1实验菌株 ．1l 2．2主要药品和试剂 ．1 l 2．3主要仪器设备 ．12 万方数据 华中农业大学2015届硕二}=研究生学位(毕业)论文2．4试剂的配制 华中农业大学2015届硕二}=研究生学位(毕业)论文 2．4试剂的配制 ．12 3方法 ．．13 3．1 pVGS／2SS．asd质粒的转化 13 3．2质粒的小量提取 ．13 3．3质粒的酶切鉴定 ．14 3．4疫苗制备 ．14 3．5实验动物饲养管理 ．14 3．5．1实验猪分组 15 3．5．2育肥猪的称重及血液、组织样采集 1 5 3．6抗SS抗体和GH激素检测 16 3