饥饿条件下Ras和Ras突变和.PDFVIP

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世界最新医学信息文摘 2016 年 第 16 卷 第 58 期 1 ·论著· 饥饿条件下 Ras 及 Ras 突变与 p53 协同作用对结肠癌细胞自噬影响的研究 1,2 3 3 2 王俊伟 ,石英 ,陈德喜 ,郭洪亮 3.北京市肝病研究所,北京 100069) 摘 要:目的 利用HCT116 p53-/- 结肠癌细胞模型研究饥饿条件下Ras 及其突变与p53 协同作用对结肠癌细胞自 噬的影响。方法 ①空白对照组;②Ras+ tAd-GFP ;③Ras 单转染组;④Ras V12 单转染组;⑤ Ras N17 单转染 组;⑥Ras+Ad-p53 组;⑦ Ras V12+Ad-p53 组;⑧ Ras N17+Ad-p53 组;随后8 组都饥饿24h 。用免疫荧光、Real- time PCR 、Western Blot 检测各组自噬水平。结果 免疫荧光显示,Ras V12 单转染组自噬率为(34.00 ±3.90 )% 显 P P 著高于空白对照组(9,17±1.60)% ( 0.01 )、Ras 单转染组(16.40±2.40 )% ( 0.01 )和N17 单转染组 P (3.56 ±0.58 )% ( 0.01 ),其中,RasN17 单转染组自噬水平最低。而p53 腺病毒处理的三组自噬水平明显升高, 以Ras V12+Ad-p53 组(57.20 ±1.70)% 最高,Ras N17+Ad-p53 组(7.80 ±1.20)% 最低。Real-time PCR 和Western Blot 显示,不论p53 是否存在,Ras V12 转染组的Atg5 、Atg7 、Beclin-1mRNA 水平及LC3 蛋白水平均显著高于Ras 及RasN17 转染组。结论 相较于突变体Ras N17 ,野生型Ras 及其突变体Ras V12 过表达能够引起饥饿条件下细胞自 噬的增加,p53 与Ras 有协同作用,能够增强Ras 的促细胞自噬作用。 关键词:结肠癌;RAS ;p53 ;自噬 中图分类号:R656.9    文献标识码:A    DOI :10.3969/j.issn.1671-3141.2016.58.001 Study on effects of Ras and Ras mutation under starvation and p53 synergistic action for colon cancer cell autophagy Wang Jun wei 1, 2 Shi Ying 3 Chen De xi 3 Guo Hong liang 2 - , , - , - 1. Jinan University, Shandong Academy of Medical Sciences Medicine and Life Sciences School, Jinan Shandong 250022 ( ; 2. Surgical Department, the 4t

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