BandPrepKit胶体DNA回收套组.PDFVIP

BandPrep Kit 膠體 DNA 回收套組 產品介紹： 本產品是利用一些化學物質將洋菜膠溶解，並穩定 DNA ，再以Silica gel 將 DNA 片段吸附。然後再清洗雜質，沖提出 DNA 之後再將其濃縮。本產品最大特色在於 回收率高 ( 約 80%) ，並且能將DNA 片段濃縮。也可應用於從溶液中純化 DNA或 探針。 本套組包裝：300 reactions 本套組包含： 1.BandPrep suspension ：1ml × 3 2.Buffer A1 ：40ml × 3 3.Buffer A2 ：45ml 4.Wash Buffer A3 ：100ml(使用前請加入 150ml的酒精 (95% 以上) 。 保 存： 本套組可保存於室溫 方法步驟： 1. 進行電泳分析後，將您所需要的 DNA 片段切下，儘可能去除周圍多餘的膠体。 2. 估計膠体的重量，大約 400ul的 Buffer A1可以溶解 100mg的膠体。 3. 估計好膠体的重量，加入適當比例的 Buffer A1後，置於 50 ℃水浴中作用 5 分 鐘，如果膠體尚未溶解完全，則再延長作用時間，務必使膠体完全溶解。 4. 將 BandPrep suspension 搖晃均勻後，取 10ul的 suspension 加入已溶解完全的 在室溫中約 5 分鐘，每隔 1~2 分鐘以手指輕彈管壁 膠体液中，進行 DNA吸附 ( 以保持 suspension的狀態 ) 。 5. 以 12000rpm 離心 5秒後，將上清液儘量去除乾淨。 6. 加入 Wash Buffer A3 (800ul) 於離心管中，將沉澱物完全打散。 7. 以 12000rpm 離心 5秒後，將上清液儘量去除乾淨。 8. 加入 Buffer A2 (150ul) 於離心管中，將沉澱物完全打散，並置於 55 ℃水浴中 1 統一編號聯絡電話：(02) 2788-2121 傳真電話：(02) 2782-9911 通訊地址：115 台北市南港區成功路一段三十二號二樓之六 分鐘。 9. 以 12000rpm 離心 5秒後，將上清液吸至另一新的離心管中儘量避免不要吸到 silica 。 10. 加入酒精(300ul) ，混合均勻，以12000rpm 離心 5 分鐘後，將上清液去除乾淨， 留下沉澱物。 【請勿過度乾燥否則很難溶解】, 11. 以 20ul的 TE Buffer 溶解。 註 解： TBE或 TAE的膠体都可以適用。 本套組的回收率是目前各商品中最高的。 對於 100bp~10Kbp都有同樣的回收率。 在步驟 8中，若置於 55 ℃的水浴中，則可增加 10~15%的回收率。 純化 PCR 產物或限制酶反應後或標定反應後的 DNA ： 1. 將未足 100ul的反應液以 H2 O 補足到 100ul 。 2. 加入 300ul的 Buffer A1,再加入 5~10ul的 BandPrep suspension 混合均勻後，靜 置 5 分鐘。( 其間每隔 1~2 分鐘輕彈管壁, 以保持 suspension的狀態 ) 3. 以 12000rpm 離心 5秒後，將上清液儘量去除乾淨。 4. 加入 Wash Buffer A3 (800ul) 於離心管中，將沉澱物完全打散。 5. 以 12000rpm 離心 5秒後，將上清液儘量去除乾淨。 6. 加入 Buffer A2 (150ul) 於離心管中，將沉澱物完全打散，並置於 55 ℃水浴中 1 分鐘。 7. 以 12000rpm 離心 5秒後，將上清液吸至另一新的離心管中儘量避免不要吸到 silica 。 8. 加入酒精( (3