代谢综合征患者肠道菌群特征及其与脾虚痰湿证的相关性研究中西医结合内科学专业论文.docxVIP

目录一、摘要 目录 一、摘要 ．1 (一)中文摘要．． ．．．．．． ． ．．．．．．．． ． ．．．．．．．．．．1 (二)英文摘要 ．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．． ．2 二、正文 ．6 (一)前言．．．(一)日U舌．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．6．．．．6 (二)资料及方法．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8 1实验材料 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．8 1．1研究对象 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．． 8 1．2研究菌群．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9 1．3主要试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 10 1．4主要仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．10 1．5人体测量及标本采集 ． ．． ．． 11 2．实验步骤 ． ． ．．．． ．．11 2．1粪便样品中总DNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1 1 2．2粪便细菌总DNA纯度及浓度测定 ． ． ． 13 2．3标准品构建 ． ．． ．． ．． ． ．．13 2．4标准曲线制作．．．．．． ．． ．．．．．．．．．．．． ． ．．18 2．5 Q-PCR反应 ．． ． ．． ．． ．．19 2．6数据统计与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19 (三)结果．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 20 1．临床基本资料统计结果 ． ．． ． ．． ． ．．20 2．DNA纯度、完整性检测结果．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．21 3．实时荧光定量PCR结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．21 (四)讨论 ．． ．。．．．。．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29 万方数据 (五)结论．．． (五)结论．．． ． ．．． ．．．．．．．．．．．．．． ．．．． ．33 (六)参考文献 ．．．．．．．．．．．．． ．． ． ．．．． ．．34 三、综述 ．37 (一)代谢综合征研究概况．．．．． ．． ．．．．．． ．．．． ．38 (二)参考文献 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．． ．43 四、致谢 ．46 万方数据 大连医科大学硕士学位论文代谢综合征患者肠道菌群特征及其与 大连医科大学硕士学位论文 代谢综合征患者肠道菌群特征及其与 脾虚痰湿证的相关性研究 摘要 研究背景 代谢综合征(Metabolic Syndrome，MS)在全球及我国均广泛流行并呈现明显的 上升趋势，目前，MS病因及发病机制尚不十分明确，治疗上亦无明显突破。近年， 肠道“微生态失衡”学说与代谢性疾病发生、发展的相关性已成为国内外研究的 热点，研究表明，肠道菌群失调在糖尿病、肥胖症的发生发展中起重要作用；而 MS与糖尿病、肥胖有着共同土壤——胰岛素抵抗：传统医学认为脾胃与肠道菌群 直接相关，而MS与“脾”的关系最为密切。这些均提示MS发生、发展可能与肠道 菌群之间存在某种相关性。目前，国内外关于肠道菌群与代谢性疾病的研究大多 集中在肥胖症、2型糖尿病，而与MS相关性的研究较少，且仅局限于动物实验水 平，关于人体肠道菌群结构和数量的研究尚未见系统报道，MS作为多种重大慢性 疾病的“高危”因素及“前期”状态，对其进行深入研究意义重大。 研究目的 1)本研究拟采用实时荧光定量PCR技术(Q．PCR)，通过对中老年MS患者及 健康对照者肠道内的4大菌门的9类主要菌群进行定量分析，进而比较MS患者 与健康人在肠道菌群数量上的差异，以阐述肠道菌群与MS的相关性，为MS的发 病机制寻找新线索，为其防治寻求新靶点。 2)同时探讨MS脾虚痰湿证肠道菌群特征，为MS的中医辨证分型提供理论依 据，探讨脾虚证的实质，并指导今后治疗。 研究方法 根据CDS(2013)MS西医学诊断标准，选取MS患者80例(脾虚痰湿证患者 40例，气阴两虚证40例)，并选取30例健康人作对照，留取粪便标本，提取粪便 基因组DNA，应用16srRNAV3序列设计各菌属特异性引物，以质粒作为标准品制 作标准曲线，通过Q．PCR反应，对各目标菌属进行绝对定量分析。 研究结果 1)MS与健康组各目标菌属数