热休克蛋白90的N端与ATP类似物的晶体结构-上海应用物理研究所.PDFVIP

Research Papers 研究报告 生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biophysics 2012,39(10):995~1002 热休克蛋白 的 端与 类似物的晶体 90 N ATP 结构揭示其功能调控* 李 健 孙丽华 徐春艳 郁 峰 周 欢 唐 琳 何建华** (中国科学院上海应用物理研究所，上海201204) 摘要 分子伴侣热休克蛋白90(Hsp90)对于许多涉及细胞周期调控、信号转导以及细胞生长调控蛋白质的折叠、成熟及稳定 是必需的．Hsp90的N端结构高度保守，包含一个ATP结合口袋并具有ATP酶活性，Hsp90的功能依赖于ATP与Hsp90结 合后诱导的构象重排及之后的ATP水解．为了深入研究ATP与Hsp90结合后N端的结构及其功能状态，使用悬滴法共结晶 了Hsp90的N端与ATP类似物AMPPNP及ATPS的复合物，并利用分子置换法对其结构进行了解析．两个复合物晶体 γ 结构都捕获到了核苷酸的电子密度，尤其是 -磷酸的电子密度，从而观察到 -磷酸与蛋白质之间的相互作用．ATPS中 γ γ γ N -磷酸的捕获证实了之前报道的结构中没有捕获到 -磷酸是其处于无序状态而非被水解．单体状态下的人源Hsp90- γ γ AMPPNP与处于二聚体化的酵母Hsp90-AMPPNP结构对比可见S1和ATPlid的位置有明显区别，结构分析表明，E18-K100 和N40-D127之间形成的氢键相互作用，在一定程度上阻碍了S1和ATPlid的摆动，很可能阻止了二聚体的形成． N 关键词 Hsp90，AMPPNP，ATPS， -磷酸，相互作用，调控 γ γ 学科分类号 Q71 DOI :10.3724/SP.J.1206.2011.00611 热休克蛋白90(Hsp90)是细胞中重要而丰富的 N端对ATP的水解，ATP与Hsp90结合后引发 蛋白质，在真核细胞中表达量可达总蛋白质含量的 Hsp90的构象变化，这些构象变化导致Hsp90表面 1%，当细胞受到外界压力刺激时，其表达水平会 疏水性的改变，使底物蛋白质与Hsp90亲和力增 [1] 进一步提高 ．Hsp90的主要功能是作为分子伴侣， 加并与Hsp90结合，然后ATPlid发生翻转，关闭 负责帮助多种底物蛋白正确折叠，100多种底物蛋 核苷酸结合口袋，N端与M端相对运动并形成N 白的成熟及稳定需要Hsp90发挥作用，其底物蛋 端的二聚体化，同时水解中心形成，在此过程中 [2-3] 白多与细胞生长及扩增相关 ．在细胞质中，人 Hsp90帮助底物蛋白质正确折叠．ATP水解为 源 Hsp90主要包括 2个异构体：Hsp90和 ADP后， -磷酸释放，Hsp90转变为更紧密的构 α γ Hsp90，它们分别由不同的基因编码，具有高度 象，折叠成熟的底物蛋白质与Hsp90的亲和力下 β 的序列同源性．2个异构体具有不同的功能， 降，从分子伴侣释放，Hsp90完成功能的执行． Hsp90在许多组织中是组成型的表达，而Hsp90Hsp90与腺苷结合的不同构象可以调节Hsp90与底 β α