肌酸激酶MB型同工酶测定SOPCKMB临床意义.docVIP

版本号: 1检测原理 CKMM同工酶的活性受--种CK-M亚单位的特异抗体的抑制。CKMB的CK-B亚单位的活性则得到 测定。CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺昔二磷酸(ADP)的可逆的转磷酸过程，产生腺昔三磷酸(ATP) o 在由己糖激酶(HK)进行催化的反应屮ATP对葡萄糖进行磷酸化，生成葡萄糖-6-磷酸盐。然后，用 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶来催化葡萄糖-6-磷酸盐和烟碱腺卩票吟二核廿酸(NAD+)的反应，生成还原的烟 碱腺嚟吟二核昔酸(NADU) o单磷酸腺昔(AMP)和1,5-二［腺#-5-五磷酸(AP5A)］被添加来抑制 腺昔酸激酶。由于形成NADPH而在340 nm处发生的吸光度变化，与CK-B亚单位的活性成正比，可 以使用双波长(340, 405 nm)技术来测量。 肌酸+ ATP磷酸肌酸+ 肌酸+ ATP ATP +葡萄糖ADP +葡萄糖 ATP +葡萄糖 M計+ 葡萄糖-6-磷酸盐+ NAD G-6-PDII 炉-磷酸葡萄糖酸+ NADPH + (H) 2标本采集与处理 1采血方法 空腹采不抗凝静脉血2?3ml。 2标木保存 采集后应及时送检。如果不能及时送检，应将标本及时离心后分离血清，-20°C可保存30d。 3注意事项 推荐选用血清。不应使用含有EDTA、肝素钠或草酸钾的采血管。酶活性的高低易受标本采集时间 的影响较大。避免溶血、脂血、黃疸。 3试剂和设备 3.1试剂 采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。 1. 1试剂组成 试剂船 1 ?5孔为磷酸肌酸 13 mM,葡萄糖 12 mM, NAD+ 1. 6 mM, ADP 1. 5 mM, AMP 7. 1 mM, AP5A 6. 1 um, N-乙酰半胱氨酸23 mM,片剂;6孔为抗CK-MO. 25mg/mL, S糖激酶4. 5U/ mL,葡萄糖-6-磷酸脱 氢酶2. 7 U/ mb,缓冲液，液体。 1.2试剂准备 直接使用。 肌酸激酶同工酶测定版本号： 肌酸激酶同工酶测定 版本号： 1.3试剂保存 试剂2-8°C保存，有效期内稳定。 2质控品 美国BIORAD液体多项质控品。 3.3校准品 西门子校准品。 4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全 口动生化分析系统。 4操作程序 4.1检测过程流程 签收样品一离心- 上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500-3000r/min,离心6?lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8°C保存。 4.4标本检测 4. 1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample No处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的 按键改变Mode （按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8:NEXT FLUID选择标木类型）。 4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行 样品检测。 4. 4检验后标本保存 标本检验完成后用釆血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。 5校准程序 1校准品准备和储存 直接使用，2?8 °C保存。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 肌酸激酶同工酶测定版本号: 肌酸激酶同工酶测定 版本号: 3校准程序 主屏幕按 F5: PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-F2: SET-UP RUN,按项冃键选择所需耍 校准的项H名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator.校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4： ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样 品架匕 按F7： LOAD/RUN-F4： RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 1质控品准备和储存 质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10??70°C可保存到瓶身有效期，未开启2-8°C可保 存90d,开启后2?8°C可保存30