2019年基因工程的原理和技术.ppt

第一章 基因工程;第二节 基因工程的原理和技术;一、基因工程的原理和操作步骤： 原理：让人们感兴趣的基因（目的基因）在宿主细胞中稳定和高效表达。 ①目的基因的获取； ②形成重组DNA分子； ③重组DNA 导入受体细胞； ④筛选含有目的基因的受体细胞； ⑤目的基因表达。;二、基因工程操作步骤：; ①从基因文库中获取目的基因; ②利用PCR技术扩增目的基因;;人工合成基因的方法;;2、形成重组DNA分子;3、将重组DNA导入受体细胞;;（2）将重组DNA导入动物细胞;1.将重组DNA导入植物细胞;;怎样筛选出已经导入质粒的细胞？;在此基础上，怎样鉴别已导入重组质粒的细胞？;图a示基因工程中经常选用的载体——pBR322质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入四环素抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。; 4.筛选含有目的基因的受体细胞;①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因（关键）;（2）基因工程的的原理及技术;检测—;基因工程的基本操作程序;1. 用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是 A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒 B.DNA连接酶和 RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达 ;2下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥;3.基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的 为模板， 成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成 。 (2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、 。 (3)假设以大肠杆菌质粒作为载体，并以同一种限制性内切酶切割载体与目的基因，将切割后的载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有 种环状DNA分子，它们分别 是 。;目的基因与质粒的连接; 基因DNA文库的构建 将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含的基因片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，感染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因文库。;;DNA分子杂交示意图 ;基因探针（DNA探针）与目的基因杂交，有无杂交带;传统的遗传育种方法有哪些？ 传统的遗传育种方法能否解决不同种生物优良性状的重组问题？ 基因工程技术如何解决不同种生物优良性状的重组问题？ ;基因工程的应用;基因工程的应用;基因工程与疾病治疗;基因工程胰岛素;基因工程胰岛素;基因工程干扰素;SCID的基因工程治疗;基因治疗SCID的过程;基因工程与生态环境保护