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肉驴人工授精技术操作规程 一、器械准备 1、洗涤：人工授精用的器械在每次使用以后，均需用洗涤剂 洗刷干净，特别是注射器，输精器内的残留精液均应彻底洗 涤，洗涤后用清水清洗，直至洗涤液清澈透明为止。 2、消毒：所有器械用品均需消毒。 高压蒸汽消毒法：用高压灭菌消毒的器械和用品有：玻璃 制品有注射器、平皿、漏斗、烧杯、三角烧瓶、量杯、玻璃 棒、输精瓶等；乳胶制品有：集精胶帽、输精胶管等；棉纱 制品：纱布、毛巾、纱网等；药品：稀释液、凡士林和石蜡 油等；将预先准备好的器械，用纱布，按器械的种类和大小 分别包起来。将包好的器械放入高压消毒器内，将输精胶管 和集精胶帽，用纱布包好一起放在器械上面。稀释液现用现 配，盛装稀释液的三角烧瓶用玻璃纸封口，将盛装稀释液的 器皿用纱布包好放在高压灭菌器内。消毒时间，高压锅煮沸 后15分钟，离开火源待用。消毒完毕，用之前取出消毒物 品，分别摆在干净的搪瓷盘中，用纱布毛巾覆盖备用。 酒精消毒物品器械：内胎、蹑子、鸡蛋外壳、水温计等。 水浴煮沸法：牛奶用6-8层纱布过滤后，将盛装牛奶的 三角烧瓶放入水浴锅内，煮沸后30分钟，取出，冷却至40°C, 用纱布过滤出上面的奶皮待用。 二、发情鉴定 直肠检查是鉴定母驴发情较为准确的方法，用手臂通过 直肠，触摸两侧卵巢上卵泡发育程度，来判断最适宜的配种 时间。检查者应剪短并磨光指甲，以防划伤母驴肠道，先以 手轻轻按摩肛门括约肌，刺激驴努责排粪，然后右手握成锥 形缓缓进入直肠，掏出前部粪便。检查者以左手检查右侧卵 巢，右手检查左侧卵巢。手进入直肠，手心向下，轻缓前进, 当母驴努责时，应暂缓，待手伸到直肠狭窄部时，以四指进 入狭窄部，拇指在外，四指向上翻，在三、四腰椎处摸到卵 巢韧带，随韧带向下捋，就可以摸到卵巢，同时由卵巢向下 就可以摸到子宫角、子宫体。摸到卵巢后，触摸两侧卵巢上 卵泡发育程度，当卵泡发育到成熟期(4期)时，即可输精。 采精技术 1、假阴道的结构和安装 假阴道由内胎、外壳、集精胶帽、气孔塞、调节钮、固 定胶圈组成。装好假阴道后，先用75%的酒精消毒内胎，待 酒精挥发后待用。 (1 )适宜的温度：先灌入1500-2000毫升的50-55°C温水, 用温度计测试假阴道内壁的温度，依公驴的习惯，保持在39 -4VC之间的最佳温度; 适当的压力：冲入气体，使采精筒大口内胎缩成三 角形为宜。 —定的润滑度：涂抹石蜡油，用玻璃棒蘸润滑剂涂抹 至假阴道内壁的前1/3。 2、采精操作 采精员站在台畜右侧，右手持假阴道采精，当公畜爬跨阴茎 勃起伸出，爬跨上台驴后，顺势轻托种公驴阴茎，将阴茎导 入假阴道。切忌用手使劲握、拉阴茎。公驴射精后，立即将 假阴道气孔阀门打开，慢慢放气。假阴道也随之逐步竖起， 使全部精液流入集精杯内，以纱布封口，送入精液处理室。 四、精液处理 凡是接触精液的器械，事先一律经高压消毒，用稀释液 冲洗后备用。 （一） 精液检查 将采取的精液用4层纱布过滤到量精杯内，以便除去胶质。 1、 肉眼观察：正常精液的颜色应为乳白色，无恶臭味，同 时记录射精量。 2、 显微镜检查：活力一般用0-1.0的10级评分，一般新鲜 采精液活力应该为0. 7—0. 8左右。驴精子活力低于0. 4者, 不能使用。驴精子密度为1.5亿/毫升，在低倍显微镜下根 据精子之间的距离来定，分为密、中和稀三等。精液过稀者, 影响受胎。 （二） 精液的稀释 将配好的稀释液加温，使稀释液的温度与精液温度基本 相近，不可过高或过低。稀释的倍数应根据受胎母驴数、原 射精量、精子密度、活力来决定所用稀释液的种类和稀释倍 数(一般为2—3倍)。对稀释后的精液要进行二次镜检，以 验证稀释效果。 1、 配制稀释液注意事项 所用物品认真清洗、消毒、干燥； 如配制液状稀释液，最好现用现配，不要长时间保存 (预混除外)。 2、 稀释液配方： 葡萄糖稀释液：无水葡萄糖7克，蒸馆水100毫升。 在实际生产中可用：取5%的葡萄糖液70毫升，10%葡萄糖 液30毫升混合放入三角烧瓶内消毒待用。 蔗糖稀释液：精制蔗糖11克，蒸馆水100毫升，消 毒后使用。 乳类稀释液：新鲜牛奶先用纱布过滤，煮沸消毒后， 再过滤冷备用。所有稀释液均应现配现用。 蔗糖牛奶混合稀释液：精制蔗糖11克，蒸馆水100 毫升，20毫升脱脂乳，2毫升卵黄，80万单位青链霉素。 3、 精液稀释方法 新采集的精液于3(TC稀释，防止精子冷休克； 采精后及时检查、稀释，时间长后精子容易死亡； 稀释液与精液温度应该一致；做到等温稀释。 稀释时，将稀释液沿容器壁缓慢倒入精液,高倍稀释时 分次进行。 4、稀释倍数计算 稀释倍数=应用稀释液的量/精液量 如何精确计算一份精液的稀释倍数？例如精液量80 ml,精 子密度按1.5亿/ml计算，精子活力0.8,每次