肌红蛋白测定SOPMYO临床意义.docVIP

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肌红蛋白测定SOPMYO临床意义.doc

肌红蛋白测定 版本号: 页码:第页共页 1检测原理 MYO方法是基于“夹心”原理的两步法酶免疫测定。样品与包被了肌红蛋白特界性单克隆抗体的 二氧化辂颗粒孵育形成颗粒/MYO复合物8。颗粒被磁化分离,去除上清液。在第二步,颗粒/MYO复合 物与共辘试剂(卜半乳糖甘酶标记的肌红蛋白特异性单克隆抗体)孵育形成颗粒/ MYO /共辘物夹心。 未结合的共辘物和分析物磁化分离和洗涤去除。夹心结合的卜半乳糖甘酶与生色团底物氯酚红-B-d毗 喃半乳糖昔(CPRG),催化底物水解为氯酚红(CPR) o因为CPR形成在577 nm光吸收改变与病人样 品屮存在的MYO浓度成正比。 MYO + CrO2-Ab CrO2-Ab- MYO + Cr02-Ab Cr02-Ab-MY0 + Cr02-Ab + Cr02-Ab- MYO- F(sb )2~P -gal + Cr02-Ab ? F(ab‘)2-BT比喃半乳糖苜 +F(ab‘ L-BT比喃半乳糖背 CrO2-Ab- MYO- F(ab, )2-p-gal + 清洗 Cr02-Ab- MYO- F(ab ) 2- 3 -gal + CrO2-Ab A CrO2-Ab + F(ab‘)2-卩-毗喃半乳糖苜 (转移到比色杯) CPRG (在577nm处不吸收) CrO2-Ab- MYO- F(abz )2-P~gal CPR (在577nm处吸收) A 2标本采集与处理 1采血方法 空腹不抗凝静脉血2?3ml。 2标木保存 室温保存,及时送检和检测。样本在2?8°C下可存储7天,在-20 °C下可保存28天。 3注意事项 推荐选用血清。在含有草酸盐的血液可能引起珞颗粒积聚,不应该使用。抗凝剂不足的冷冻血浆 样品可能引起洛颗粒积聚,不应该使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。 3试剂和设备 1试剂 采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。 1. 1试剂组成 试剂船1孔为结合物0.09 mg/mL,液体;3孔为抗体?CrOz1.8mg/ml,片剂;4 ~ 6孔为CPRG103mM, 朋^红蛋白测定 版本号: 页码:第页共页 片剂;7孔为底物稀释剂,缓冲液42 mg/mL,液体;8孔为稳定及,珞片剂,缓冲液,液体。 1.2试剂准备 直接使用。 1.3试剂保存 试剂2?8°C保存,有效期内稳定。 3.2质控品 美国BIORAD质控液。 3.3校准品 西门子校准品。 4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 4.1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500~3000「/min,离心6-10min,分离血清上机测定。若标本不能及吋检测,将分离的血清冷藏 与2-8 °C的冰箱内。 4.4标本检测 4. 1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的 按键改变Mode (按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority (按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式)、Fluid (按F8:NEXT FLUID选择标本类型)。 4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行 样品检测。 4.4.4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按口期放好,保存期为7天。 5校准程序 1校准品准备和储存 朋^红蛋白测定 版本号: 页码:第页共页 直接使用,2?8 °C保存。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 3校准程序 主屏幕按 F5: PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter—F2: SET-UP RUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选屮相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照市低到高的顺序输到对应位置,按F4: ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样 品架上,按F7: LOAD/RUN-F4: RU

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