旱冬瓜遗传多样性的RAPD分析-林木遗传育种专业论文.docxVIP

摘要：遗传多样性是林木遗传育种的物质基础。但是，传统林术遗传育种主要 摘要：遗传多样性是林木遗传育种的物质基础。但是，传统林术遗传育种主要 考虑遗传增益。而忽视了林木遗传多样性问题，导致了一些严重问题的出现。 现在，林木育种学家已经意识到，长期育种应以维持育种群体遗传变异为主要 目的，以物种生物学、群体遗传学和居群生态学为理论基础。 早冬瓜(Alnus D．Don)是云南省重要的造林、用材树种，但是 林分退化相当严重，影响了该树种的利用价值。因此对其进行遗传改良非常必 要。本论文运用RAPD标记技术对旱冬瓜种群遗传多样性进行研究，希望可以 为该树种的遗传改良策略定制提供科学的依据。主要结论如下： (1)利用CrAB法成功抽提出符合实验要求的DNA样品。 (2)建立了旱冬瓜RAPD分析技术体系：25ul反应体系中，含lxBuffer， 1．9mM／LMgCl2，n3pM随机5|物，0．25mM／L DNTPs，1．25U DNA摸 板。反应程序为：94℃预变性4min，然后执行40个扩增循坏，每个循环中， 94。C变性40s，36℃退火40s，72℃延伸1rain。最后72℃延伸10mla。 (3)采用16个引物对分布于云南省的4个早冬瓜群体共60个个体进行了 RAPD扩增和分析，得出物种水平的多态条带百分率(PPB)为52．舛％，Nei 的基因多样度(Ht)为O．1268。分子方差分析(AMOVA)表明。在总遗传变 异中，群体内遗传变异占96．91％；POPGENE给出的基因分化系数(Gst)为 0．0751：物种的遗传变异主要存在于群体内。 (4)早冬瓜属风媒植物，借助风力可将花粉传送到很远的距离。因此，备 群体之闻存在频繁的基因交流，这是群体之问盼遗传差异非常小(3．09％， AMOVA；7．51％，POPGENE)的最重要原因。另外，如果在试验取样过程中 再合理些，可能会使试验结果更糖确。 关键词：旱冬瓜，遗传多样性，遗传结构，遗传变异，RAPD Abstract：Genetic Abstract：Genetic diversity breeding．However，the tlee more ignore genetic diversity，this led problem．Now,they more more aware term breeding should aim maintaining should be mainly． A／nus nepalensis most afforestation Yunnen province．But some work the improvement some scientific making improvement author studied diversity molecularmarker． results following： (1)The DNA extracfion purification A／nus D．Don has been made means improved CTAB． (2)The RAPD system established．The velum 25u1．Reaction DNA,0．25uM，L eseh dNTPs。1。9mM／L MgCt2，0．3pM random primer and polymerase．RAPD program rain 94℃for predenaturation；then 94℃for annealing,60s 72℃for extension；finally 72℃for 10min． (3)A 60 individuals populations of Alnus Ytmnan were surveyed using primers。At of polymorphie bends(FPB)was 52．94％，Nei’s diversity(Fit)is 0．1268．AMOVA showed that 96．91％of genetic diversity resulted from differentiation within populations．The coefficient of gene differcntiation(GsO POpGENE O．0751，indicating high genetic diversity existing within populations． (4)Alnus nepalensis D．DOn is anemophilous plants,the posen spread with the gene is high among populati