梭鱼和青鳉鱼ERα介导的雌激素活性比较研究.PDF

中国环境科学 2010,30(11) ：1490~1495 China Environmental Science 梭鱼和青鳉鱼 ERα 介导的雌激素活性比较研究 郝丽妮 1,2,赵砚彬 2,彭 辉 2,黄 崇 2, 陈树林 1,胡建英 2* (1.西北农林科技大学动物医学院, 陕西 杨凌 712100 ；2.北京大学城市与环境学院,北京 100871) 摘要：为从物种雌激素受体(ERα)敏感性差异的角度探索辽东湾野生梭鱼雌雄同体高发生率的一个可能原因,从梭鱼肝脏 cDNA 中扩增出 长 1113 bp 的梭鱼 ERα(sERα) DEF 区片段,并以此构建 pGBT9-sERα DEF 质粒,将其和 pGAD424-TIF2 质粒依次转入 Y190 酵母细胞中,建 立了 sERα 物种特异性的酵母双杂交筛选系统.在此系统中测试了 4 种环境中主要的雌激素雌酮(E1)、17β -雌二醇(E2)、雌三醇(E3)及 17α- 炔雌醇(EE2)对梭鱼 ERα 的诱导活性,半数雌激素活性浓度(EC50)为 3.7、2.4 、1698.7、1.2nmol/L,分别是青鳉鱼 ERα 活性的 4.6 、2.3 、3.4、 3.3 倍,说明梭鱼 ERα 对 E1 、E2 、E3 、EE2 具有较高的敏感性,这为解释辽东湾梭鱼雌雄同体的高发生现象提供了重要线索. 关键词：ERα ；梭鱼；酵母双杂交测试；物种敏感性 中图分类号：R994.6 文献标识码：A 文章编号：1000-6923(2010)11-1490-06 Comparison of ERα-mediated estrogenic binding activity between So-iuy mullet (Mugil soiuy) and medaka. HAO 1,2 2 2 2 1 2* Li-ni , ZHAO Yan-Bin , PENG Hui , HUANG Chong , CHEN Shu-Lin , HU Jian-ying (College of Animal Medicine, Northwest AF University, Yangling 712100, China ；2.Department of Urban and Environmental Sciences, Peking University, Beijing 100871, China). China Environmental Science, 2010,30(11)：1490~1495 Abstract ：To explore a possible reason why the wild So-iuy mullet of Liaodong Bay has high frequency of intersex from the point of view of specie-specific ERα binding sensitivity, a cDNA fragment of 1113 bp encoding So-iuy mullet (sERα) estrogen receptor DEF domain was amplified and used to construct plasmid pGBT9-sERα DEF. pGBT9-sERα DEF was transfected into Y190 yeast cells together with plasmid pGAD424-TIF2 for establishinig the sERα-specific in vitro system in yeast. Then we tested the sERα agonistic affinity of four major environmental estrogenic chemicals including estrone (E1), 17β -estrogen (E2), estrodial (E3) and ethylestrodial (EE2). Their half maximal concentration