高效液相色谱法分析葡萄糖异构酶在变性剂中的构象变化与活性的关系.PDF

第 卷第 期 色 谱 年 月 高效液相色谱法分析葡萄糖异构酶在变性剂中 的构象变化与活性的关系Ξ 王 淳 陶丽梅 耿丽萍 罗 丹 滕脉坤 王玉珍 崔 涛 中国科学技术大学生命科学学院 安徽合肥 摘要 建立了监测葡萄糖异构酶在不同浓度变性剂中构象变化过程的高效液相色谱法 葡萄糖异构酶在天然条 ∀ 件下 以四聚体形式存在 在不同变性剂的不同浓度下 会解聚成二聚体或单体 或整体结构变松散 而且葡萄 糖异构酶的活性随着构象的变化也会有相应的变化∀ 关键词 高效液相色谱法 葡萄糖异构酶 变性剂 中图分类号 文献标识码 文章编号 实验方法 前言 样品的制备 链霉菌 所产 的分 葡萄糖异构酶简称又 离纯化参照文献方法进行∀ 酶活力的测定 连续法参照文献 非连续 称木糖异构酶在体内可催化 木糖与 木酮糖之间的异构化反应 在体外催化 法参照文献∀ 样品的处理 将 分别加入含不同浓度盐 葡萄糖与 果糖之间的转化 是高果糖浆的工业生 酸胍或脲的 三乙醇胺盐酸缓冲液中 产用酶 具有重要的商业价值 同时 它也是一个较 好的蛋白质工程研究模型∀ 我们选用了我国自行筛 在 ε 下变性∀ 样品洗脱 色谱柱为 选的链霉菌 菌株所产的 进行研究 此前 ∀ ≅ 洗脱液为含 本课题组已得到了该酶的晶体结构该酶晶体以