电致化学发光免疫分析测定人绒毛膜促进性激素.PDFVIP

tt~拳拳报 A~A OmmOA 8I阳OA 1鹏， 50， 594-6佣 、 电致化学发光免疫分析测定人绒毛膜促进性激素 安镜如特 〈福州大学化学系，福州， 350002) 林建国 (武汉产品质量监督检验所，武汉，430015) 本文用电化学发光法进行了人绒毛膜促进性激素(简称 HCG)的免疫分析研究.实验在Na2COr NaHCOa-KCl 介质巾以Co01 ABEI，检测限达到1.3 X 10-12 mol.L-\ 为催化剂测定发光标记试剂 2 ABEI-HCG 标记物稀释至2x10~ 倍仍可检出.采用双抗法测定了血清中的 HCG. 七十年代中期 Hailmann 首先将化学发光应用于免疫分析E刀，创建了化学发光免疫分析 法(LIA) ，它具有发光法高灵敏度和免疫分析的高选择性等优点，使它成为放射免疫分析法 总 (RIA)、酶免疫分析(EIA)和荧光免疫分析(FIA)强有力的竞争者.近十年来LIA 法不断发 展与完善，在医学、生物学和卫生领域有广泛的应用(2-4] 非[N-4(氨基 i 基)-N-乙基]一氨基- 2 , 3一二氧吩瑾嚓-1，←二酣(简称 ABEI) 是化学发光兔疫分析中常用的发光标记物.它具有 发光效率高、标记容易、标记后不丧失发光能力等特点.近年来 ABEI 在免疫分析中的应用日 益受得重视. HOG 是糖蛋白的激素，受孕后它的分泌量开始增加，因此建立高灵敏的 HOG 测定法对 计划生育工作有着重要意义. 用电化学发光法进行免疫分析，目前在国内外均未见有文献报道.我们在实验中选择了 12 N u200s-NaHOOa-K01 介质，以 00012 作催化剂测定ABEI 的灵敏度可达1.3 X 10- moljL , Õ ABEI-HOG 标记物稀释至2x10 倍，仍可检出，达到了兔疫分析的水平.本文应用双抗法测 定了人体血清中的 HOG，得到了满意的结果. 仪器和试剂 仪器 EOL-1 型电致化学发光仪叫pHS-2 型酸度计; 751 型分光光度计;XWT 台式自 动平衡记录仪; Sephadex G-50 层析柱;自动部分收集仪. 试剂 ABEI(福州大学化学系在供纯品). 1. ABEI 贮备液配制z 称取0.0069g ABEI , 加入 û.2mol.L-1 NaOH 1 四L 及少量水搭解后p 于 25mL 容量瓶中用水定容至刻度，得lx 3 10- mol. L -1 ABEI 洛液.置于冰箱内避光保存.稀故度 ABEI 搭液由此液稀释而得 0 .4 mol.L- 1 Na 00s 和 û.4mol.L-1 NaHOO pH 的缓冲溶液. 1mol.L-l 按一定比例配成不同 2 s K01 搭液; 2. 钻(II) 标准搭液: 1mgjmL 贮备液，稀搭液由此液稀释而得.戊二醒 28% 水溶 液.0.lmol.L-1 (pH 7.6). 透析纸;HOG 粉末; 3. HCG 放射免疫试剂盒:内含 磷酸盐缓冲液 冻干 HOG 标准品，冻干 HOG 第一抗体， HOG P.B.S，冻干正常兔血清，冻干第二抗体(上海 生物化学制品研究所). :标记物稀释液t 用 100mL HOG P.B.S 榕解冻干正常兔血清成为该 稀释液 所用试剂均为分析纯.实验用水为石英亚梯二次蒸馆水. 19告1 年