基于DNA适配体芯片上电致化学发光生物传感器的制备及应用分析-分析化学专业论文.docxVIP

独创性声明本人声明，所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 独创性声明 本人声明，所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得信阳 师范学院或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示 了谢意。 签名：诲歼 日期：翻7年夕月衫日 学位论文使用授权书 本人完全了解信IjItN范学院有关保留、使用学位论文的规定， 即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅。本人授权信阳师范学院可以将本学位 论文的全部内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或 其他复制手段保存或汇编本学位论文。同时授权经信阳师范学院认 可的国家有关机构或论文数据库使用或收录本学位论文并向社会公 众提供信息服务。 (保密的论文在解密后应遵守此规定) 研究生(签名)：藓鲜导师(签 期：砂，t《月名 摘 摘 要 适配体是经过SELEX技术筛选合成出来的单链DNA或者RNA短链。由于适 配体具有制备方便、稳定性好、亲和力强，且能高效、特异性的结合各种生物目标 分子，使其越来越受研究工作者的关注。近年来，DNA适配体已经成为临床、药 物、食品、卫生及环境检测等领域的研究热点。 量子点具有独特的小尺寸效应和荧光特性以及良好的生物兼容性，已被广泛的 应用到各个领域。电致化学发光分析法(ECL)因不需要光源、背景干扰小、较高 的灵敏度、较宽的线性范围以及良好的重现性和选择性，使其逐渐成为分析检测中 的重要手段。这些技术的有效结合使得高灵敏度、高选择性，甚至在线、实时、活 体检测等成为可能。本论文在上述基础上开展了以下研究工作： 设计了一种新型、灵敏、简单、仅用一条适配体构建的ATP三明治夹心型电致 化学发光生物传感器。首先在ITO电极上原位还原低表面密度的纳米金，然后再组 装上适配体的一段断链。利用适配体两条断链天然构型之间的吸引来完成对目标分 子的识别。体系的ECL信号随着ATP的浓度增加而增大。依此建立的方法的线性 范围为0．2～100 nmoFL。检出限为0．02 nmol／L。方法具有高选择性和高灵敏度，适 用于其它生物小分子。 基于量子点芯片电致化学发光，构建了一种新型的DNA适配体生物传感器用 于检测凝血酶。首先刻蚀芯片电极，然后在ITO电极上原位合成纳米金。然后通过 巯基连接上凝血酶适配体，再通过温育固定上凝血酶目标物。而没有结合凝血酶的 DNA适配体与5’．生物素标记的互补DNA低聚核苷酸(eDNA)杂交形成双链DNA 低聚核苷酸结构，再结合亲和素标记的量子点。此传感器的电化学信号与凝血酶浓 度成反比，依此建立了凝血酶的分析方法。方法具有选择性好、稳定性高和灵敏度 高等特点。 关键词：DNA适配体：电致化学发光；量子点；芯片 AbstractAptamers Abstract Aptamers are single stranded DNA molecules or RNA that produced by SELEX technology．Aptamers have received widely attention because of its merits，such as simple synthesis，good stability,high affinity and specificity to many biologic targets· Recently,aptamers have been fleetly developed and used in many fields such as clinical pharmacy,food hygiene，environmental supervision，etc． Quantum dots(QDs)have received仃ernendous attention for their possible luminescent applications in aqueous solution．With size tunable narrow emission spectra and broad excitation spectra,they have been widely used as multicolored luminescent probes，biological labels and bioimaging．Electrogenerated chemiluminescence(ECL) has many advantages such as