基于DNAzyme和石墨烯的电化学生物传感器的制备 及其应用研究-分析化学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 分类号： UDC： 密 级： 保密年限： 年 基于 DNAzyme 和石墨烯的电化学生物传感器的制备 及其应用研究 Study on the Preparation and Application of Electrochemical Biosensor Based on DNAzyme and Graphene 学科门类： 理学 学科专业： 分析化学 论文作者： 肖世秀 指导教师： 张艳丽 培养单位： 化学与生物技术学院 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的作品成果 。对本文的研究做出重要贡献的个人和 集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人 承担。 百!论文作者签名: 签字日期 : 百!  4 月 j 日 关于论文使用授权的说明 学位论文作者完全了解云南民族大学有关保留和使用学位论文的规定，即: 研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属云南民族大学。学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查 阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩 印或其它复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后遵守此规 定〉 学位论文作者签名: 瓦￠表 签字日期 : tc tS年 6 月 l 日 导师签名: 槐花局 签字日期 : 俨仗年 j 月 j 日 万方数据 万方数据 万方数据 摘要 摘要 摘 要 在城镇化进程加快,工业迅速发展壮大的今天，环境问题日益突出，也成为 公众最为关心的问题之一。苯二酚在染料、农药、橡胶等工业领域有着广泛的 用途，它同时也具有一定的毒性，低的降解性使其成为了环境中的一类污染物。 重金属离子的危害性已为人们所熟知，它们难以被微生物降解，并且可以通过 大气、水源、食物等方式进入人体，在人体内的累积严重威胁了人们的健康和 生命安全。因此，建立一种灵敏、快速、简便的环境污染物的分析检测方法对 控制污染和保护人类生命健康都具有非凡的意义。较之传统的污染物检测分析 方法，电化学生物传感器具备的成本低、灵敏度高、选择性优良、响应快等优 点，已经在生物医药、环境检测分析、食品等领域有较高的应用价值。因此， 本论文的研究内容，构建了基于DNAzyme的电化学传感器对铅离子的检测以及 石墨烯/二氧化钛纳米材料的电化学传感器对苯二酚的检测。具体内容如下： （1）基于DNAzyme构象转变构建的铅离子电化学传感器。本章节中，设计 了基于铅离子活性依赖的DNAzyme发生特异性断裂通过二茂铁作为信号表达的 铅离子传感器。将二茂铁标记到带有氨基的DNAzyme 5末端，另一端通过S-Au 键的结合固定到电极上，由于碱基的互补配对，使得标记有二茂铁的一端折回 来形成“发夹”结构，二茂铁靠近电极表面，发生了电子的传递，电化学信号 增强，当溶液中含有铅离子，酶的活性被激活，促使底物链的断裂，标记二茂 铁的一端DNA从电极上游离到溶液中，电化学减弱，通过对电化学信号的变化 来实现对铅离子的检测。体系响应信号与铅离子浓度的对数在 0.5～5000 nM浓 度范围为内呈良好的线性关系，该传感器对铅离子的检出限达到 0.25 nM。在实 验结果表明，该传感器制备简单，性能良好，选择性高。 （2）基于二茂铁标记DNAzyme 构建的铅离子电化学传感器。设计了两条 DNA探针用于构建铅离子诱导DNAzyme中核糖核酸(rA)水解致使电活性基团脱 落引起电化学信号变化的铅离子传感器。通过琥珀酰亚胺耦合的方法将二茂铁 标记到DNA2 的 5端，修饰了二茂铁的DNA2 与DNA1 碱基互补配对进行杂交， 标记有二茂铁一端的柔软T链，受一定的重力影响，垂坠下来，二茂铁靠近电极 表面，产生显著的氧化还原电流，仪器能够捕捉到强的电化学信号。当引入铅 I 云南 云南民族大学硕士学位论文 离子后，铅离子的诱导作用，促使rA位置水解，二茂铁一端的DNA链随之游离 掉落在溶液中，仪器能够检测到的电化学信号显著下降，加入铅离子浓度的差 异直接导致电化学信号的变化的差异，从而可以对铅离子进行定量检测。体系 响应信号与铅离子浓度的对数在 0.2～1000 nM浓度范围为内呈良好的线性关 系，该传感器对铅离子的检出限达到 0.11 nM。该传感器灵敏度高、线性范围宽， 检测限低、响应迅速。 （3）基于石墨烯/二氧化钛纳米材料的苯二酚电化学传感器研究。本章构建 了基于Gr-TiO2 纳米材料修饰玻碳电极的电化学传感器用于邻苯二酚和对苯二酚 的同时测定。利用循环伏安法（CV）和差分脉冲伏安法（DPV）对邻