使用创新生物兼容性UHPLC系统评价单克隆抗体和肽的生物-Waters.PDF

[ 应用纪要] 使用创新生物兼容性UHPLC系统评估单克隆抗体和肽的 生物分离方法并进行方法转换 Brooke M. Koshel、Ximo Zhang 、Robert Birdsall、Corey Reed 、Stephan Koza 、Zhimin Li和Paula Hong 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 简介 目前市场上的许多畅销药物以及不少正在研发中的药物都是生物制剂。由于生物制剂比小分子药物更复杂，因此其分析方法以及监 管机构要求的分析方法往往也比较复杂。迄今为止，生物制剂开发及质量控制实验室使用的分析方法大多都是基于HPLC的方法。 尽管HPLC在某些情况下的确可以满足分析需求，但采用更加现代化的仪器改进原来的系统和方法能给实验室带来明显的优势。各 1 监管机构也认可并支持此观点，即通过产品生命周期管理改进制药工艺性能，从而提高产品质量，确保患者安全。 产品生命周期包括产品开发、产品制造以及技术转换。在引入新技术时，仪器是否具有稳定的性能以及是否易于部署非常重要。本 文将介绍新上市的生物兼容性UHPLC平台(图1)如何为改进产品生命周期管理提供支持，展示该系统在这方面的优势。将HPLC平台 升级，可以获得更出色的分离度和更大的峰容量。由于分析方法需在各个内部实验室以及合同研究机构之间转换，因此必须保证不 同实验室都能得到一致的结果。鉴于此，本研究在多个仪器平台之间进行了方法转换，并根据保留时间和峰面积百分比评估了仪器 平台的方法转换性能。升级实验室仪器之后，分析人员不仅能完美重现传统方法，还能充分利用新的色谱柱技术和低扩散系统，从 多方面提升方法性能。 图1. ACQUITY Arc Bio系统。ACQUITY Arc Bio系统是一款采用生物惰性材料的四元 UHPLC系统，不仅能避免因接触高盐浓度流动相而发生系统腐蚀(不锈钢材料的常见 问题)，还能减少残留，是分析生物分子的理想之选。 结果与讨论 完美重现已有方法，确保方法等效性 条件。样品：1 mg/mL英夫利昔单抗溶于20 mM磷酸钠溶液中， Agilent 1260 Infinity I pH 6.8；色谱柱：Protein-Pak Hi Res SP, 7 µm, 4.6 × 100 mm；流 生物惰性四元系统 动相(pH 6.4)：MPA：100 mM磷酸二氢钠；MPB：100 mM磷酸 氢二钠；MPC：500 mM氯化钠；MPD：水；流速：0.5 mL/min；柱 温：30 °C；样品温度：4 °C；吸收波长：280 nm；进样体积： 20 µL。 梯度表: %A %B %C %D ACQUITY Arc Bio 系统 初始 14.3 5.7 5.0 75.0