软珊瑚萃取物Pregna-120-dien-one对人类血癌细胞株HL-60生长.PDFVIP

軟珊瑚萃取物 Pregna-1,20-dien-3-one 對人類血癌細 胞株 HL-60 生長之影響 (Effects by Pregna-1,20-dien-3-one, a Novel Bioactive Steroids, from the Soft Coral Umbellulifera striata in human leukemia HL-60 cells.) 1 2* 張懿政 、黃胤唐 1 2* Yi Zhang Zhang , Ying-Tang Huang 1 國 立 高 雄 海 洋 科 技 大 學 水 產 食 品 科 學 系 2 國 立 高 雄 海 洋 科 技 大 學 海 洋 生 物 技 術 系 E-mail address: ythu ang@mail.nkmu.edu.tw . (Y-T Huang) 摘 要 本 實 驗 利 用 採 至 台 灣 墾 丁 的 Umbellulifera striata 種 軟 珊 瑚 中 所 萃 取 出 之 類 固 醇 化 合 物 Pregna-1,20-dien-3-one (Pregna) 為 實 驗 材 料，進 行 其 對 人 類 血 癌 細 胞 HL-60g 生 長 抑 制 作 用 之 探 討 。 初 步 結 果 發 現 Pregna 對 HL-60 有 明 顯 的 生 長 抑 制 作 用 ， 且 呈 現 明 顯 的 劑 量- 時 間 依 存 效 應 (dose-and time-dependent response) ，IC 50 約 為 2.5 μg/ml ；由DNA 電 泳 分 析 發 現，處 理 Pregna 會 造 成 HL-60 DNA 的 片 段 化，亦 會 造 成 其 染 色 質 濃 縮 之 現 象 ； 在 流 式 細 胞 儀 (flow cytometry) 的 實 驗 顯 示 Pregna 促 使 HL-60 細 胞 的 凋 亡 小 體 含 量 上 升 ， 在 西 方 墨 點 法 的 實 驗 的 結 果 裡 亦 顯 示 Pregna 會 造 成 細 胞 中 caspase-3 與 -9 被 活 化 以 及 Poly ADP ribose polymerase (PARP) 被 切 割， 並 可 觀 察 到 細 胞 色 素 C 釋 放 至 細 胞 質 中 。 我 們 使 用 了 凋 亡 酵 素 抑 制 劑 z-VAD-FMK 抑 制 了 caspases 的 活 性 後 ， 可 明 顯 抑 制 Pregna 所 誘 導 的 細 胞 凋 亡 ， 證 明 caspase 的 活 化 於 凋 亡 過 程 中 扮 演 重 要 角 色 。 綜 合 以 上 結 果 我 們 可 以 推 測 ， Pregna 造 成 人 類 血 癌 細 胞 株 (HL-60 cells) 的 凋 亡 ， 可 能 是 透 過 細 胞 色 素 C 釋 放 至 細 胞 質 後 ， 活 化 了 caspase-9 以 及 -3 ， 最 後 則 因 PARP 的 降 解 而 造 成 DNA 的 片 段 化 而 使 細 胞 最 終 走 向 凋 亡 的 命 運 。 本 實 驗 證 實 Pregna 能 有 效 誘 導 HL-60 發 生 細 胞 凋 亡 的 現 象 ， 因 此 ， 進 一 步 以 實 驗 證 明 其 詳 細 路 徑 是 必 要 的 ， 可 進 一 步 評 估 Pregna 對 血 癌 治 療 的 價 值 性 ， 以 及 期 待 在 未 來 能 作 為 一 有 效 的 治 療 模 式 。 關 鍵 字 ： Pregna-1,20-dien-3-one 、 血 癌 細 胞 、 細 胞 凋 亡 、caspase