基于大脑NNSACP网络模式正天丸头痛治疗作用的机制研究-中药学专业论文.docxVIP

中国医学科学院北京协和医学院 中国医学科学院北京协和医学院 硕士学位论文 基于大脑NNSACP网络模式 正天丸头痛治疗作用的机制研究 摘要 近年来研究表明，疼痛感知的形成是脑内广泛分布且等级性强的多个大脑皮 层和皮层下中枢结构间相互联系的神经网络参与编码、加‘T：和调节的。现代疼痛 研究己从单一模式研究转变为大脑的疼痛感知一情绪一认知多维模式(The neural network associated with the sensory，affective and cognitive dimensions of pain， NNSACP)研究。头痛作为直接的中枢性疼痛，与知觉、情绪和认知脑功能属性 紧密相连。众所周知，突触传递与疼痛研究具有密切关系。近年来，海马作为边 缘系统的一个关键组成部分，除了与学习记忆及情绪有关，海马也被认为在疼痛 传导通路中也占有重要地位，参与各种疼痛信息的处理，多数的锥体细胞可对各 类伤害性刺激做出反应。而且疼痛引起了海马的形态改变和一些生理机制变化， 影响了海马的记忆和情绪功能。因此，我们选择正大丸对海马神经回路突触传递 的影响作为本研究的重点之一，以具有代表性的哺乳动物内嗅区一齿状回一CA3 侧枝一CAl海马三级神经回路为研究靶点。从不同的视角来揭示了正天丸对头痛 治疗作用的分子机制。实验共分为四个部分： 第一部分正天丸对硝酸甘油所致大鼠头痛模型的行为学作用研究 目的 研究正天丸对硝酸甘油诱发的实验性头痛大鼠行为学的影响。 方法 SD大鼠共分为5组：牢白组，硝酸甘油模型组，正天丸低、高剂量(0．54，1．08 g／kg)，阳性药物西比灵组。连续灌胃给药10天，末次给药半小时后，采用皮 下注射硝酸甘油来复制模型，通过观察大鼠耳红出现及消失的时间，前肢挠头， 后肢挠头，爬笼，甩头等指标来评价正天丸对其‘般行为学的影响。 结果 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院 中国医学科学院北京协和医学院 硕士学位论文 1．基本行为表现：注射硝酸甘油后动物立即出现活动增加，前肢频繁挠头，烦 躁不安，于造模后30 min达到顶峰，60 min以后动物活动逐渐减少，出现倦卧 状态。 2．耳红：正常组始终没有出现耳红现象，而模型组在注射硝酸甘油最早2．1 min 出现耳红现象，平均在4 min出现耳红：耳红消失时间最早在63 min，平均消失 时间为76．2 min。 3．挠头次数：模型组大鼠的前肢、后肢挠头次数均显著性的增加(P0．001，P 0．001)：正天丸高剂量组也可显著降低前肢、后肢挠头次数(P0．001，P0．01)； 正天丸低剂量组可显著降低前肢挠头次数(P0．05)，但对后肢挠头次数没有显 著影响(P0．05)；西比灵作为阳性对照，表现出了与正天丸低剂量相似的作用。 4．爬笼次数：正天丸高剂量可减少大鼠爬笼次数，但无显著性差异(Po．05)， 正天丸低及西比灵组没有减少大鼠的爬笼次数，与模型组相较无显著性差异(P 0．05．P0．05)。 5．甩头次数：正天丸低、高剂量及西比灵组均可以显著性减少大鼠的甩头次数 (P0．05，P0．01，P0．001)。 结论 硝酸甘油成功构建了大鼠头痛模型，且正天丸可显著缓解硝酸甘油诱发的头 痛基本症状。 第二部分正天丸对海马内嗅区前穿质一齿状回通路突触传递的作用 研究 目的 研究止天丸对大鼠海马内嗅区前穿质．齿状回突触传递的影响。 方法 采用在体场电位记录方法，大鼠乌来糖麻醉后，将其头部_丁．上{=杆0．5—0．6 cm 处l古I定在脑立体定位仪上，参照大鼠脑立体定位图谱定位PP及DG区位置，Jl_}j 颅钻按照图谱位置在大鼠脑上打孔，用来放置记录电极R和刺激电极S。以Dur： 100 gs，Interl：30 S的刺激方波记录基础刺激诱发出稳定的PS波形。稳定记录30 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院 中国医学科学院北京协和医学院 硕士学位论文 min后，给予高频刺激诱导突触长时程增强(LTP)形成，并研究正天丸低、高剂 量(0．54，1．08 g／kg)及阳性药物西比灵对海马前穿质一齿状回通路突触传递的影 响。 结果 与空白组相比较，模型组高频刺激后各个时间段Ps增幅值均降低(P 0．05)：与模型组比较，正天丸高、低剂量组及西比灵组的高频刺激后各个时间 段PS增幅值均明显增加(P0．001，P0，01，PO．05)。 结论 整体大鼠电生理实验中，硝酸甘油诱发的头痛可明显降低海马前穿质-齿状 回通路PS增幅值；正天丸低、高剂量和西比灵可显著性增加前穿质一齿状回通路 PS增幅值；结果显示正天丸对海马前穿质一齿状回通路突触传递有显著的增强作 用。