用RAPD方法分析六个品种猪的亲缘关系-华南农业大学.PDFVIP

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2019-03-01 发布于天津
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用RAPD方法分析六个品种猪的亲缘关系-华南农业大学.PDF

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用RAPD方法分析六个品种猪的亲缘关系-华南农业大学

　　18 ()　1997:85 ～89 J.Sou h China Ag ric.U niv. 　　 RAPD 刘德武　杨关福　李加琪 (华南农业大学动物科学系, 　广州, 　510642) 　140 10 、、、、DN A RA PD , 23 , 66 , 51 , 1 ～ 11 , 4.2 。, 、 , , 2 4 、;4 , , 3 , 。　RA PD;;; 　S 828.2 　　D NA (Random amplified polymorphic DNA, PA PD )90 (Willams e al, 1990 ;Welsh e al, 1990 )DNA , (Polymerase chain reac ion, PCR), (Res ric ion f ragmen leng h polymorphism, RF LPs )Sou h- ern 、, DNA , , 、, , (, 1996)。1990 (, 1995 ;A mau, 1994 )、(Amornra , 1995 )、 RA PD 、(Demeke e al, 1992;Kresovich e al, 1992;Susan e al, 1993 ) ()、(M ar in e al, 1991;S ammers e al, 1995 )。 RA PD 、、、、 DNA , 6 。、。 1 　 1.1 　　　、、、、。(20 ), 。、3 ～5 m L,2%EDT A ,4 ℃。 1.2 　DNA 　　(1988),10 000 r/min 10 min,,0.4 %KCl 　1997-07-0 3 收稿　刘德武, 男, 3 1 岁,硕士　86　　　　　　　　 18 ,0.85%N aCl , 1×T ES, K (10 mg/mL ), 20%SDS, 50 ℃( ), T ris 、/(23:1), DNA, 75% T E,55 ℃, 。　　DNA 3 μL,2 μL , 1%( 0.5 μg/mL EB )。1×TA E , 3 ～4 V/cm ,20 min, D NA 。DNA (, 1993 ), ,25 ng/μL 。DNA, 20 ,4 ℃。 1.3 　RAPD-PCR 　　PCR :(1992)、(1993),140 10 ( OPERON ,:E01-20,F 01-20,G 01-20,H01-20, I01-20,J01-20, L01-20)6 DNA PCR 。PCR 25 μL, 10×PCR 2.5 μL,dNTP (2 mmol/L)1.25 μL,MgCl (5 mmol/L)2.5 μL, (5 2 pmol/μL)1 μL,TaqDNA 1 U (),DNA 4 μL, 25 μL,,。: 94 ℃45 s,36 ℃60 s,72 ℃120 s,38 ,72 ℃10 min。　　:PCR 20 μL, 3 μL , 2% (0.5 μg/mL EB ),1×T A E , 3 ～4 V /cm, 2.5 ～3 h,、。 1.4 　　　(S )(d )(We on e al, 1987;Jeff reys e al, 1987;Dunning on e al, 1990 ): 　　S =2N ab/(N a +Nb ) 　　N ab DNA a b , Na DNA a ,Nb DNA b 。、。S , S ,