间斑寇蛛粗毒的采集、生物活性分析和蛋白质组学研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

中文摘要间斑寇蛛(Latrodectus 中文摘要 间斑寇蛛(Latrodectus tredecimguttatus Rossi，1790)隶属 于球蛛科的一种中型蜘蛛，又称黑寡妇蜘蛛，是西前世界上所知毒性 最强的蜘蛛之～。 本研究成功地对闻斑寇蛛进行—亍室内人工键养，并对阔斑寇蛛的 形态特征、生活羽性与生态行为等进行了观察和分析，同时研究和探 讨了滋度、湿度鞫食物对闻褒寇蛛活动麓力、残活拳貊生殪力麓影镌。 经统计分析，雌蛛平均体长10．037nnn，体重0．4759；雄蛛平均 体长4。58mm，体重0．1049。一头雌蛛平均可产郛袋4个，每个奥袋 可孵出幼蛛200—300头。雌、雄幼蛛分别蜕皮6-7次和4次后变为成 蛛。成蛛大多在入冬前死去。雄蛛寿命98-144天，雌蛛寿命130—300 天。雌蛛与迟孵化约30天左右的雄蛛配对时，产卵率高于与阊批孵 化的雄蛛配对。间斑寇蛛幼蛛度过适当长度的“卵袋期”对于以后的 成活与正常发育是必要的。在影响闻斑寇蛛室内键养效果瀚多霉孛因素 中，相对湿度是最重要的。问斑寇蛛生长发育的最适合温度为25。。C， 相对瀑度为65％。 通过对电刺激和分离毒囊等几种采毒方法的比较，发现电刺激是 最佳憋采毒方法。惩反捆赛效渡楼色谱、蒺谱、双淘电泳等方法对毫 刺激和分离毒囊得到的粗毒的的组成进行了比较研究。 电劁激粗毒翻分离毒囊褥到的粗毒对小鼠黢黢注射的∽。值分 别为为0．393mg／kg和0。164 mg／kg。通过电生理实验发现该粗毒能 阻断小鼠离体膈神经膈肌的神经肌肉传递。当加入6 阻断小鼠离体膈神经膈肌的神经肌肉传递。当加入6 u g／ml毒囊取褥 的褪毒，完全阻断时阊为25。O±2．2min；丽加入3．2 p g／ml电刺激 取的粗毒，完全阻断时间为23．3±2．2min，说明电刺激粗毒的生物 学活性要离子分离毒囊缛囊的趟毒熬生秘学活性。 对分离毒囊得到的粗毒采用双向凝胶电泳进行了分离，对凝胶图 象分聿厅发瑷该褪毒中分子量IOKD-90KD酶羧懂蛋自含羹辜富，两碱性 蛋白含量和分子量IOKD以下的小分子量蛋囱含量较少。从图象上可 以识别出500个左右盼蛋白质点，对其中∞个蛋自鹱点用胰蛋囊酶 进行了胶内酶解，并进行了质谱分析和数据库搜索。共捺定了77个 蛋白质，并对其中部分蛋白质的功能进行了探讨。 关键词：间斑寇蛛，生态学，人工饲养，活体采毒，生物学活性，礞 囱藏缝学分享厅 Vf AbstractThe Abstract The spider Latrodectus tzedecimguttatus，also called black widow spider，belongs to the family of Theriodiidae．It is a medium-sized spider and iS one of the most poisonous spiders in the world。 In the present study，the spiders￡．tredeci#zEattatus were successfully indoor—reared．The morphology，1lying inhabits and ecological behaviors of the spider were observed and investigated．At the same time，the effects of temperature， humidit y and food on the activities， survival rate and fecundi t Y were also investigated． The statistical analysiS indicates that the average lengths of female and male spider 8re lO。37mm and 4。58mm， respect ively：and the average body weights are 0．4759 and 0．1049 ，respectively．The average number of egg bag laid by a female spider i S 4。About 200—300 baby spiders hatched from an egg bag．Baby female and male spiders grew into adult spiders after 6-7 peelings and 4 peelings，respectively。Most adult spiders died before the beginn