甲状腺癌特异性高甲基化基因蛋白水平筛查研究-遗传学专业论文.docxVIP

— — PAGE 1— 摘 要 甲状腺癌特异性高甲基化基因蛋白水平筛查研究 研究生：杨 曦 导师：夏米西努尔·伊力克 教授 摘 要 目的：选择腺癌特异高甲基化候选基因，开展甲状腺病变组织免疫组化筛查， 通过蛋白表达分析，寻找甲状腺癌发生与蛋白表达缺失的关系，为甲状腺癌的基因 甲基化研究提供特异、敏感的指标。方法：1）本课题选择 5 种文献报道确认的腺癌 异常性甲基化基因（CDH1、MLH1、TIMP3、ESR1 和 MGMT）；2）应用免疫组织 化学方法检测腺癌特异高甲基化基因在 71 例甲状腺癌、26 例甲状腺腺瘤、15 例桥 本氏甲状腺炎、10 例结节性甲状腺肿及 12 例正常甲状腺组织中的蛋白表达水平；3） 建立一种稳定、安全提取石蜡组织中高质量 DNA 的方法，优化甲基化 PCR 的条件。 结果：1）CDH1、MLH1 蛋白表达水平在甲状腺病变中表达差异均有统计学意义（P ＜0.05），随着甲状腺病变恶性程度升高呈降低趋势，同时 CDH1 蛋白表达水平降低 与 PTC 和 FTC 的临床分期、淋巴结转移密切相关；2）ESR1、MGMT 蛋白表达水平 在甲状腺病变中有差异，随着甲状腺病变恶性程度升高呈上升趋势，并与甲状腺癌 组织学类型相关，均有统计学意义（P＜0.05），同时 ESR1 蛋白表达水平升高与甲状 腺癌的临床分期及淋巴结转移密切相关；3）TIMP3 蛋白表达水平随着甲状腺病变恶 性程度升高呈降低趋势，但无统计学意义（P＞0.05）；4）在甲状腺癌中，MLH1 分 别与 CDH1、TIMP3 蛋白表达水平，MGMT 与 ESR1 蛋白表达水平，均呈正相关（P ＜0.05）；5）5 例甲状腺髓样癌中，CDH1 蛋白均表达，ESR1 蛋白表达缺失，3 例甲 状腺低分化癌中，CDH1 及 ESR1 蛋白均表达，TIMP3 蛋白表达缺失；6）在甲状腺 癌中 CDH1、MLH1、TIMP3、ESR1 和 MGMT 蛋白在性别、年龄和民族组中表达均 无差异。结论：1）CDH1、MLH1 及 TIMP3 蛋白低表达可能与甲状腺癌发生、转移 有关；2）ESR1 蛋白高表达与甲状腺癌发生有关，并提示预后良好，阻断其作用环 节可能为甲状腺癌提供新的治疗方法；3）MGMT 蛋白高表达现象可能与甲状腺癌恶 性程度有关，可作为候选临床分子诊断指标；4）在甲状腺癌中，MLH1 与 CDH1、 TIMP3，MGMT 与 ESR1 之间蛋白表达有一定的相关性；5）甲状腺癌组织的 CDH1、 MLH1、TIMP3、ESR1 及 MGMT 蛋白在性别、年龄和民族组表达均无差异，有望成 为共用检测指标；6） 蛋白水平筛选出 CDH1、MLH1 及 TIMP3 基因作为甲状腺癌 特异性高甲基化基因来进行甲基化分析。 关键词：特异性高甲基化基因； 甲状腺癌； 免疫组织化学 新疆医科大学医学硕士学位论文 Screening of thyroid cancer specific hypermethylated genes at the protein level Postgraduate: Yang Xi Supervisor: Prof. Xiamixinuer·Yilike Abstract Objective: To conduct the immunohistochemistry screening study on thyroid gland pathological tissues by selecting the thyroid cancer specific hypermethylated candidate genes, and the relationship was detected between the occurrence of thyroid gland cancer and protein expression defect through analyzing the expression miss rate of thyroid gland cancer specific protein candidate indexes and find specific and sensitive index for gene methylated searching of thyroid gland cancer. Methods: 1) In this study, five kinds of abnormal gland cancer methylation genes such as CDH1, MLH1, TIMP3, ESR1 and MGMT were selected, which had already been c