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固相多肽合成树脂的特征和进展的论文 摘要：讨论了固相多肽合成（spps）的基本原理，以及固相 多肽合成树脂的特征和进展；着重讨论了聚苯乙烯?苯二乙烯树脂的 性质。 关键词固相多肽合成（spps）树脂 前言 自从1963年meirifield发展 成功了固相多肽合成 （spps）方法 以来，经过不断的改进和完善，到今天这个方法已 成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成 法无法比拟的优点。 固相合成的主要设计思想是［1］：先将所要合成肽链的疑未端氨 基酸的轻基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂*相连，然后 以此结合在固相载体*上氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基保护基， 并同过量的活化羟基组分反应接长肽链。重复（缩合一洗涤一去保 护一中和和洗涤一下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度； 最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多 肽。 将固相合成与其它技术分开来的唯一特征是固相载体。 merrifield和erickon提出了一种有用的载体必须满足的普遍要求 ［2］: 它必须包含反应位点，以使肽链能连在这些位点上，并在以后 除去；它还必须对合成过程中的物理和化学条件稳定；载体必须允 许在不断增长的肽链和试剂之间快速的、不受阻碍的接触；另外， 载体必须允许提供足够的连接点以使每单位体积的载体给出有用产 量的肽，并且必须尽量减少被（载体）束缚的肽链之间的相互作 用。?虽然这些要求的限度还不是很清楚。 并不是所有的要求都很容易达到；而且这里还有一些矛盾。在 一个被液体介质自由渗透的轻度交联的胶状系统中，被缚肽链和溶 解的试剂之间的不受阻碍的接触似乎可以很容易达到。传统的聚苯 乙烯（ps）树脂就是这种类型；另一方面，被缚肽链之间的相互作 用可以在一个固体表面功能化的、刚性更强的系统中达到。曾研究 过表面功能化的硅，但它的容易可能很低。在这些极端之间有许多 实用的或潜在的固相系统，对它们有各种描述：爆米花、巨孔、巨 网和接枝共聚物。实际中发现简单的凝胶状树脂具有最好的综合性 能［2］。用于多肽合成的高分子载体主要有三类［3］：交联聚苯乙烯; 聚酰胺；聚乙烯?乙二醇类树脂。 1、聚苯乙烯?苯二乙烯交联树脂 1.1树脂的选择和性质 聚苯乙烯?苯二乙烯交联树脂是多肽合成中最早、最常用的固相 载体，其结构如图1?1 *树脂是一种有机聚合物，作者认为在 反应基团（接头）导入前的叫树脂比较适合，如聚乙烯?苯二乙烯。 聚丙烯酰胺；树脂导入接头后则叫载体，但通常不用严格区分，可 笼统使用。 图1.1 它由小珠体构成，直径20-150U mo为了使载体具有较大的网 格空间足以容纳不断增长的较长肽链而且便于反应物进入载体内 部，一般均采用1?2%交联度的ps树脂。但交联度过低，则溶胀性 过大，不易过滤, 过大，不易过滤, 而且机械性能不好，易于破碎。有人采用了另外 一类办法。例如，① 采用高达20%交联度的ps树脂。这种树脂 的内部网格很小，类似于实心球。因此，肽链的接长反应只能在树 一层低交联或无交联的pso③用20%交联的ps珠体为核心，再 在表面聚合上一层低交联的ps制成表层树脂或者在kel-f上进行幅 照接技。但①和②的应用较果并不理想。1?2反应基团的导 脂表面上进行。② 脂表面上进行。 ② 以玻璃珠或聚乙烯醇（pva）为内核，聚合上 上面的聚合物是起支撑和载带作用，并不能直接连上（第一 个）氨基酸，必须要在苯环上导入反应基团（接头）。最简单而最 常用的基团是氯甲基。它可以通过一个傅氏反应导入（式1?1）: （1.1） 它能同n?保护氨基酸的轻基反应形成节酯的结构而把起始氨基酸挂 到树脂上。反应如式1.2o (1.2) 由于氯甲基树脂同m保护氨基酸的羟基反应的条件较为激烈， 有的氨基酸，如his和met等，还可能发生烷基化等副反应。因 此，除一方面发展了反应活性较高的漠甲基树脂外，又发展了轻甲 基树脂（1-2） o它可以由（1?1）通过式1?3反应来制备。 (1.3) 但是，由于用于氯甲基化的氯甲基乙醯有致癌作用；并且ps的氯甲 基化被认为是一个潜在的麻烦反应，因此它增加附着在聚合物上其 它官能团被污染的机会；同时，人们主要从两个方面对数值作了改 进。① 在苯环上导入?cl、?no2、-conhr等吸 电子 基团；② 将 节酯形式改为更易酸解的二苯甲酯或烷氧节酯。在boc化学中，通 常认为 ① 可能增强对酸的稳定性，不过裂解产率可能稍低一些, 但总的还是认为有利的。atheron和sheppard则认为改进后的树脂 可通过不包含氯甲基化和其它的傅氏反应来获得最大的优点［1］。他 们主要是讨论fmoc方法 的。如将对?轻甲基苯乙酸与氨甲基聚苯 乙烯结合，得到所谓的pam树脂（1-3） o在boc和fmoc化学中