姜黄素诱导的免疫耐受性人树突状细胞的研究-内科学(消化病学)专业论文.docxVIP

Th Th Helper T lymphocyte 辅助性T细胞 TCR T细胞受体 2 徐州医学院硕士学位论文 徐州医学院硕士学位论文 姜黄素诱导的免疫耐受性人树突状细胞的研究 中文摘要 目的观察姜黄素对人外周血来源的树突状细胞的成熟状态和免疫学功 能的影响。 方法聚蔗糖．泛影葡胺(ficoll-hypaque，F-H)密度梯度离心法获得健康人 外周血单个核细胞(p甜pheral blood mononuclear cell，PBMC)，在含有重组人粒- 巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte—macrophage colony stimulating factor,rhGM．CSF)、重组人白介素·4(recombinant human interleukin-4 ，rhlL．4)的培养基中培养6天获得未成熟树突状细胞(immature dendritic cell， DC)。实验共分四组：①未成熟DC组(imDC组)、②脂多糖组(LPS组)、③ 姜黄素组(curcumin，Cur组)、④姜黄素+脂多糖组(Cur+LPS组)。流式细胞术 检测DC表型CD80、CD86、CD83和HLA．DA的表达情况以及DC吞噬葡聚糖 的能力，酶联免疫吸附法(enzyme linked immtmosorbent assay,ELISA)检测各组 细胞分泌白介素．12(interleukin．12，IL．12)的水平，四甲基偶氮唑盐法(Methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)检测DC刺激同种异体T淋巴细胞增值的能力。 结果①姜黄素能够显著抑制DC共刺激分子CD80、CD86、CD83和抗原 提呈分子HLA．DR的表达，并呈剂量依赖性，当Cur+LPS组Cur浓度为20 la mol／L、 30 la mol／L时共刺激分子CDS0、CD86、CD83和抗原提呈分子HLA．DR的表达与 LPS组比较差异有统计学意义(尸O．05)。②Cur作用后的DC，加入LPS后其吞 噬葡聚糖的能力无影响，Cur+LPS组和LPS组吞噬葡聚糖的阳性细胞百分率分别 为(92．74-3．6)％、(19．0+3．8)％，两组比较差异有统计学意义(P0．05)。⑨Cur 作用后的DC，加入LPS后其上清液中IL-12的分泌量为(100．0+5．1)pg／ml，与 LPS组(510．5±11．2)pg／ml比较差异有统计学意义(尸0．05)。④Cur作用后的 DC，加入LPS后其刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力与LPS组比较明显减弱， 徐州医学院硕士学位论文差异有统计学意义(氏O．05)。 徐州医学院硕士学位论文 差异有统计学意义(氏O．05)。 结论姜黄素能够抑制人树突状细胞的成熟，从而诱导产生免疫耐受性人树 突状细胞。 关键词姜黄素； 树突状细胞；免疫耐受 徐州医学院硕士学位论文Study 徐州医学院硕士学位论文 Study on the induction of human tolerogenic dendritic cells by CUrCUmln Abstract Objective To investigate the effect of curcurnin(Cur)on the maturation and immunological function of human peripheral blood-derived imDC． Methods Peripheral blood mononuclear cells were isolated from human peripheral blood by Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation，and then cultured in the medium including rhGM—CSF and rhlL-4 for 6 days．There are four groups：① immature DC group(imDC group)，②lipopolysaccharide group(LPS group)，③ curcumin group(Cur group)，④curcumin and lipopolysaccharide group(Cur+LPS group)．The DCs were analyzed by flow cytometry for the expressions of CD80，CD83， CD86 and HLA-DR．Endocytosis of DCs to dextran WaS also analyzed by flow cyt