金雀异黄素对培养人视网膜色素上皮细胞增殖和凋亡的影响-眼科学专业论文.docxVIP

摹·车正上|孽嘎士t蕾佟i缩略语袁 摹·车正上|孽嘎士t蕾佟i 缩略语袁 DAB diaminobczidin 二氪基联苯胺 DIG digor,／geo／n 她高辛 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 DN’rP d∞xyTibo．nucl∞sid∞／rlphosphates 脱氧三磷酸核替混合物 DMEM Dulbocco’s modified Ea91e medium DulbocEo改良E咄培养液 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EGF epidermal growth factor 表皮生长因子 FGF fibroblast growth factor 成纤维细胞生长因子 HE hematoxylin and eosin 苏木囊一伊红 MTT teuazolium salt 四哇溴盐 NO nitrogen monoxide 一氧化氯 OD 叩6cal density 光密度 PBS plIosplIa塘buffssolution 磷酸缓冲液 PCD progrmnmed cell death 程序性细胞死亡 PDGF platelet-derived growth factor 血小板源性生长园子 PKC p,otein kinase C 蛋白激酶C 陬 la,otein lyrosiae kinase 蛋白酷氮酸激酶 PVR proliferative vitreoretinopathy 增生性玻璃体视网膜病变 RPE retinal pigmant epithelial cell 视网膜色素上皮细胞 TBS tris buffered saline Tris缓冲生理盐水 TdT terminal deoxynucleoddyl transferase 末端脱氯核苷酸转移酶 丁GF-8 transforming growth factor-B 转化生长因子．B TNF-d tomor necrosis factor-口 肿瘤坏死因子．a Tris tris(hydroxymcthy)xaminomethane 三羟甲基氮基甲烷 117N日， U：rminal denx,yn∞leotJdyl打mld白：ase· 末端脱氯核昔酸转移簿介 mediatedd m nick-end·labelling 导的缺口末端标记 VEGF vascular endothelial growlh factor 血瞥内皮生长因子 it·车‘上学J重士量隹语文金雀异黄素对培养人视网膜色素上皮细胞增殖 it·车‘上学J重士量隹语文 金雀异黄素对培养人视网膜色素上皮细胞增殖 和凋亡的影响 中文摘要 目的孔源性视网膜脱离或视网膜脱离手术后并发的增生性 玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)，其病理改 变的特征是一系列的细胞活动，主要是视网膜色素上皮细,胞(retinal pigment epithelial cell。m E)发生迁移，增生，形态变化，合成某些 蛋白质和细胞外基质，形成可以收缩的膜，属于临床上的难治性 疾病．已有的研究发现，PVR是一种过度的创伤愈合过程，存在 着砌堆的异常增殖和死亡的失衡。如何抑制RPE增殖和诱导其向 凋亡方向发展，对PVR的转规有着重要的意义．金雀异黄素是一 种天然的酪氮酸激酶抑制剂，可以抑制多种肿瘤细胞的增殖，并 诱发细胞凋亡．本实验旨在研究金雀异黄素对RPE的增殖和凋亡 的影响． 方法通过MTT比色法和核仁嗜银蛋白染色分析，观察金雀 异黄素对RPE增殖的影响；通过TUNEL染色和形态学观察，研 究金雀异黄素对RPE凋亡的诱导作用。 1、结果 (】)不同浓度脸雀异黄素可以抑制职E增殖，在25reg．／L-- lOOmed-,的范围内呈现剂量效应关系，抑制率为12 o％一 64．6％口0 05)；并随时间的延长。抑制效应增强。嗜银蛋白染色 结果；50 mu／t,金雀异黄素作用12h即有胞核内AgNORs的减少， 平均数为2．7口=0．034)，25 ms／I．金雀异黄素作用24h盾，其胞核 内A斟Oms的数量平均为3．9(P=0．023)。并随着剂量的增加和时间 的延长．胞核内AgNORs的数量减少。 (2)不同浓度自§金雀异黄素可以诱导RPE凋亡，50mWL浓度 作用24h即有TUNEL阳性的凋亡细胞出现，其凋亡细胞酉分数的 中位数为7．6％，48h此值为9．8％，72h此值为】3．7％；75mg／L浓 度作用24h 10 3％，48h 16．4％，72h 23 4％；100mg／L浓度作用24h 15．4％，48h21．2％，72h 35 8％。透射电镜观察，50mWL浓度作用 于细胞，胞核内