第二十章 经典液相色谱法演示课件.pptVIP

第三节 离子交换色谱法  各种离子在大多数交换体系中其交换能力的顺序基 本一致，根据已有的研究成果，可以总结出以下经验规 律： ① 在低浓度水溶液中和常温下，阳离子的交换亲和 力随其电荷的升高而增大。 ② 常温下，在低浓度水溶液中，等价阳离子的交换 亲合力随水合离子半径增大而变小，随其裸离子半径增 大而变大。 ③ 阴离子的亲合力受阴离子的电荷数，离子的大 小，交换离子的浓度，以及树脂的性质所影响。 精选编制 第三节 离子交换色谱法  ④ 在高浓度的水溶液中和常温下，由于离子失去水合分 子，其交换亲和力的差异可能变小或顺序颠倒。 ⑤ 在高温和非水溶液中，同价离子对树脂的亲合力并不 随其离子半径增大而增大，而是彼此相似，甚至变小。 ⑥ H+离子和OH－离子的亲合力随树脂的交换基团的性质 不同而有很大的差异，这取决于H+离子和OH －离子与交换基 团所形成的酸和碱的强度，酸碱强度愈大，其亲合力愈小。⑦ 高分子量的有机离子和金属配离子，对树脂有较大的 亲合力。 ⑧ 能与树脂的交换基团生成配合物或难溶化合物的离子 都对树脂具有较大的亲合力。 精选编制 第一节 吸附色谱法 2.相对比移值Rst 为了解决由于Rf值重现性差，进行定性困难的 问题，常采用相对比移值Rst来定性。 相对比移值Rst的定义为： Rst值是相对Rf值，是样品与参考物移动距离之 比，可消除许多系统误差。参考物是另外加入也可 以直接以样品中某一组分作为参考物。 Rst值可以大于1。 精选编制 第一节 吸附色谱法 （二）定量分析 1．间接定量法 (洗脱测定法) 薄层展开后，将被测物 斑点或区带捕集，用溶剂洗 脱，然后再用适当的分析方 法(比色法、分光光度法、 气相色谱、荧光分析法等) 测定含量。 精选编制 2．薄层扫描法 该法快速、简便，结果灵敏、准确，适用于多 组分物质和微量组分的定量。 （1）薄层扫描仪 薄层扫描仪光学 系统结构示意图 精选编制 第一节 吸附色谱法 ①测定方式及原理 A 吸收测定法 可见区(370～700 nm)用钨灯，紫外区(200～370nm)用氘灯为光源。 B 反射测定法 光束照到薄层斑点上测量，反射光强度。 C 透射测定法 光束照到薄层斑点上，测量透射光强度。 D 荧光测定法 用汞灯或氙灯(200～700 nm)为光源。 精选编制 吸收参数（KX）与样品浓度成正比，所以无论是反 射法还是透射法，测得值与样品之间都不呈线性。 透射法测定时，SX值越大，吸光度越大；反射法测 定时，SX值越大，反射度越小。 SX值取决于薄层吸附剂的性能、粒度和分布情况。 SX值要预先测定，通过仪器的线性补偿器，用电路系统 将弯曲的曲线校正为直线后用于定量。 线形校正 1-校正前的标准曲线 2-校正后的标准曲线 精选编制 第一节 吸附色谱法 ②扫描方式 扫描方式分线性(直线)扫描和锯齿(曲折)扫描法。 锯齿形扫描方式能消除展开后斑点形状不规则而引 起的误差，可获得满意的定量结果。 ③双波长法扫描 光源的光分两路，通过两个分光器出来两束不同波 长的光。一路用于测量样品，称样品波长λS；另一路 做为对照，称参比波长λR。 双波长法可以消除斑点处薄层本身的干扰，消除薄 层厚度不均匀引起的基线波动，能可靠地检测痕量组分. 精选编制 第一节 吸附色谱法 （2）定量方法 ①外标法 分为外标一点法和外标二点法。 A 外标一点法 工作曲线通过原点（截距为零） 时可用外标一点法定量，需点一种 浓度的对照品溶液。 C＝F1·A C为样品的浓度或重量，A为样品的峰面积，F1为直线的斜率或比例常数 精选编制 B 外标二点法 工作曲线不通过原点时，只能用外标二点法定 量，至少要点在同一薄层板上二种不同浓度的对照 品溶液(或一种浓度两种点样量) 。 F1 和F2都是通过测量随行的对照品溶液的浓度（C1和C2）和 峰面积