病毒学2教学课件.ppt

第二章 病毒学 二、 病毒形态与大小 单正链RNA=mRNA 结构和非结构蛋白 中间复制体 正链翻译晚期蛋白 负链复制子代核酸 单负链RNA 正链 RNA 中间复制体 （依赖RNA的RNA多聚酶） 裂解（Disintegration）: naked virus cause the host cell lysis 出芽（Budding）: enveloped viruses 病毒增殖的细胞效应 病毒在复制过程中阻断或抑制宿主细胞的正常代谢，可致细胞损伤、裂解并释放出大量的子代病毒（如脊髓灰质炎病毒等）。 出芽释放的病毒（如疱疹病毒等）虽然不直接裂解细胞，但在体外细胞培养中可因细胞功能及新陈代谢的改变最终导致细胞死亡。 有些病毒（如巨细胞病毒）的子代病毒很少释放至细胞外，而是通过细胞间桥，或通过细胞融合方式侵入新的细胞。 反转录病毒则一方面可以出芽方式释放子代病毒，另一方面还可通过整合有病毒基因的细胞分裂，而将病毒基因传递给子代细胞。 至于基因分节段的RNA病毒（如流感病毒等）如何能有效地分别复制各节段并有序地将各节段装配成完整病毒体，还是尚未解决的问题 干扰现象（interference) : 两种病毒感染同一种细胞，常发生一种病毒的增殖抑制了另一种病毒复制的现象，称干扰现象。有时同种病毒的不同型或不同株之间也可发生干扰现象。机制：IFN、受体。 顿挫感染:因细胞条件不合适，病毒虽然可进入宿主细胞，但是不能复制的感染过程被称为顿挫感染（abortive infection），亦称流产感染。构成顿挫感染的细胞被称为非容纳性细胞（non-permissive cells），而能支持病毒完成正常增殖的细胞则被称为容纳性细胞。 传统遗传学所用的方法和技术虽很复杂很繁琐，但在这一阶段研究中对病毒基因及功能的分析提供了有意义的成果。例如已知ts变异株常伴有毒力减弱，我国学者将甲型肝炎病毒感染细胞置于相对低的温度下连续传代，结果筛选出减毒的甲肝病毒株，制备了疫苗，并已用于预防甲型肝炎。此外，重组技术在目前研制以痘苗病毒为载体的多重新型疫苗中也仍被沿用。利用重配来研究流感病毒的分子流行病学和发展疫苗也在进行中。传统病毒遗传学的优点为将病毒基因改变与生物特性直接联系，能较快地揭示病毒基因的功能。 （二）分子遗传学 1 病毒基因结构分析 通过对甲型流感病毒基因的研究分析，了解了8个基因节段编码的蛋白功能，从而对其编码的血凝素抗原进行测序分析，并及时发现带有非人来源（禽、猪）流感病毒血凝素的毒株； 通过对丙型肝炎病毒基因组分析，发现有较多的编码非结构蛋白的基因，其中已可确定编码病毒RNA聚合酶基因的序列和位置。 2 病毒保护性表位的确定 根据核苷酸序列分析，分别克隆与表达不同的病毒包膜蛋白，经免疫原性研究，可以确定表达保护性抗原的位点，如在乙型肝炎病毒表达中已确定编码表面抗原中“α”决定簇表位（第120-147位氨基酸）是具有保护性的表位。 3 病毒抗原高变区的分析 根据基因分析，HIV的包膜抗原编码区（env）中有易发生突变的高变区，容易逃逸机体的免疫应答。 4 与毒力相关的基因编码区分析 狂犬病病毒基因分析发现，编码病毒G蛋白第333位氨基酸若由精氨酸变为谷氨酰胺或异亮氨酸，则病毒在神经细胞中的增殖及扩散力将大大降低。 5 耐药性变异分析 临床上应用针对病毒酶的药物后，有时病毒经过短暂被抑制后又重新复制。分析病毒酶的基因编码区可发现核苷酸序列的变异与耐药性发生的关系。 八 病毒分类 病毒分类的原则： 病毒基因组特征（核酸类型、G+C组成、核苷酸序列等） 病毒的形态和结构（形状、大小、衣壳排列、有无包膜等） 理化性质和抗原性等 依据分类原则，将病毒分为科、属、种。由结构、性状相关并亲缘关系相近的病毒成员组成病毒属（Virus genera），属名后用后缀-virus，如Enterovirus（肠道病毒属）；由结构、性状相关和有亲缘关系的病毒属组成病毒科（virus families），科名后用后缀-viridae如picornaviridae（小RNA病毒科）。目前将病毒分为71科，164属和4000多种病毒。 近年发现一些比一般病毒更小的非寻常病毒的致病因子，称为亚病毒（subviru），包括卫星病毒（satellite）、类病毒（viroid）和分类学上尚未确定归属的朊粒（Prion）。 卫星病毒：多数与植物病毒相关，少数与噬菌体或动物病毒相关。如腺病毒的卫星病毒。卫星病毒可分为两大类，一类可编码自身的衣壳蛋白；另一类为卫星病毒RNA分子，曾被称为拟病毒（virusoid），需利用辅助病毒的蛋白衣壳。 类病毒：均为