人c肽时间分辨免疫荧光分析解析试剂盒的研制3资料.pdfVIP

200 　临床检验杂志 2005年第 23卷第 3期 　Ch ine se Journal of Clin ical L aboratory Science, 2005, Vol23,No3　 文章编号 : 100 1764X (2005)　　中图分类号 : R 587　　　文献标识码 : A ·实验研究 · 人 C肽时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制 1 2 2 2 1 1 1 2 汤永平 ,吴英松 ,杭建峰 ,徐伟文 ,孙胜利 ,余伟鸿 ,周志聪 ,李明 ( 1广州市达瑞抗体工程技术有限公司 ,广 州 510663; 2 第一军医大学热带医学研究所 ,广州 510515) ( ) ( ) 摘要 : 目的　研制人 C肽 Cp ep tide 时间分辨免疫荧光分析 TRF IA 试剂盒 。方法 　采用双抗体夹心一步法建立 C肽 TRF IA 试剂盒 ,对试剂盒的各项指标进行评价 。结果 　试剂盒的可测范围为 0. 5 ～22 ng/m l,灵敏度为 0. 045 ng/m l,批内、批间的变 ( ) 异系数 CV 分别为 4. 1% ～6. 7%和 5. 4% ～6. 8% ;与胰岛素无交叉反应 ,与胰岛素原的交叉反应率为 9. 0% 。30份血样用本 试剂盒与国外同类试剂盒同时检测 ,其相关系数为 0. 992。结论 　试剂盒各项指标均达到临床检测要求 ,可替代国外同类产 品试剂盒 。 关键词 :人 C肽 ;时间分辨免疫荧光分析 ;试剂盒 ) μ 　　血清 C肽水平不受外源性胰岛素 、胰岛素抗体 N a CO , pH 9. 0 200 l, 8 000 r /m in 离心 5 ～6m in , 2 3 的影响 ,能更准确地反映人胰 岛 β细胞的分泌功 重复此洗涤步骤 6 次 ; 反转离心柱 , 2 000 ～3 000 能 。检测方法 有 酶 免疫 法 ( E IA ) 、放 射 免疫 法 r /m in离心 1 m in ,收集滤液 ,此即浓缩和纯化好的标 ( ) ( ) R IA 、化学发光免疫分析法 CL IA 。时间分辨免 记抗体 ,然后加入 0. 05 m g铕标记试剂充分混匀 , ( ) [ 1 ] 疫荧光分析 TRF IA 灵敏度高 ,特异性强 ,不存在 25 ℃振荡过夜 。 同位素 的放射性污染 。我们对研制 的 Cp ep tide 1. 4 　 Eu3 + 标 记 抗 体 的纯 化 　标 记 完 成 后 用 ( ) TRF IA 诊断试剂盒评价如下 。 Sep hadex G50层析柱 1 cm ×30 cm 分离纯化 ,洗 ( ) 1　材料和方法