课件：实验五小麦萌发前后淀粉酶活力的.pptVIP

实验五?? 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 一、实验目的 1．学习测定淀粉酶活力的方法。 2．了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。 二、实验原理 休眠种子中主要含有β-淀粉酶，而α-淀粉酶是在萌发过程中形成的。种子萌发时，淀粉酶活性随萌发时间迅速增加，将淀粉分解成小分子糖类，供幼苗生长。 β-淀粉酶水解非还原端的第二个α-1,4-糖苷键，水解产物为麦芽糖。 淀粉的水解产物麦芽糖有还原性能与3，5-二硝基水杨酸试剂反应，使其还原生成红色3-氨基-5-硝基水杨酸。 在一定范围内，其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比，可用麦芽糖（或葡萄糖）浓度表示，用比色法测定淀粉生成的还原糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。 ?? 三、试剂 1.? 0.1％标准麦芽糖溶液 20毫升：精确称量100毫克麦芽糖，用少量水溶解后，移入100ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度。 2．pH 6.9，0.02摩尔／L磷酸缓冲液 100毫升 3．1％淀粉溶液100毫升：1克可溶性淀粉溶于100毫升 0.02摩尔／L磷酸缓冲液，其中含有 0.006摩尔／L氯化钠。 4．1％3,5-二硝基水杨酸试剂: 1g 3,5-二硝基水杨酸溶于20毫升2摩尔／L的氢氧化钠溶液和50毫升水中；再加人30克酒石酸钾钠，定容至100毫升。若溶液混浊，可过滤。 5．1％氯化钠溶液300毫升 6．海砂5克 四、操作步骤