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CDX2在慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞中的表达及意义 张青兰1（通讯作者）刘延方2范玮3 （1郑州市第二人民医院内七科450000） （2郑州大学第一附属医院血液科450003； 3郑州市第五人民医院血液科 450053） 【中图分类号】R733.7【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 （ 2012 ） 12-0145-03 【摘要】目的为探讨CDX2在慢性粒细胞白血病中的表达情况，木实验应用 RT-PCR方法检测慢慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞单个核细胞中CDX2 mRNA 的表达水平。方法 慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞由郑州大学基础医学院 干细胞中心惠赠和10例非恶性血液病患者的骨髓液，检测CDX2 mRNA在慢性白 血病中的表达情况。结果CDX2 mRNA在慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞中 高表达。结论 提示CDX2与慢性粒细胞白血病的发牛发展可能有关。 Expression and clinical significance of CDX2 in chr onic myeloge no us leukemia 【Abstract 】 Objective:!n order to investigate the expression of CDX2 in chronic myelogenous leukemia, mRNA expression of CDX2 in bone marrow cells from patients with chronic leukaemia patient and chronic myeloid leukemia cell line?K562 cell will be assessed by RT-PCR. Method: Chronic myelogenous leukemia cell line-K562 cell was kinderly provided by Stem Cell Research Center of Zhengzhou University and 10 example nonmalignant nosohemia patients marrow fluid, company CDX2 mRNA in chronic myelogenous leukemia expression situation. Results: K562 cell also expressed high level of CDX2 mRNA. Conclusion: Indicating that CDX2 may con tribute to the growth and developme nt of chronic myeloge nous leukemia. 为探讨CDX2在白血病中的表达情况，木实验应用RT-PCR方法检测慢性 粒细胞白血病细胞株K562细胞单个核细胞中CDX2 mRNA的表达水平，初步探讨 CDX2在白血病发生、发展中的作用。 一材料与方法 1研究对象及分组 细胞株为慢性粒细胞白血病急变期细胞株K562细胞，由郑州大学基础 医学院干细胞中心惠赠；对照组为骨髓正常的非恶性血液病患者10例。 2实验方法 单个核细胞的分离 细胞株单个核细胞的分离，取EDTA抗凝的骨髓液或细胞株2-4ml,加 等量淋巴细胞分离液离心，取中间白膜层，用生理盐水洗涤2次，取lul标本液 置光学显微镜下做单个核细胞计数，取约ltimes;107个细胞的标本液，离心去 上清，力nA lmITRIZOL, ?80°C保存待用。 RNAiso reagent 提取细胞总 RNA 取?80°C保存的标本，室温静置5?10分钟，使其充分溶解，依次加入 三氯甲烷、异丙醇、75%乙醇洗涤沉淀，溶解于20mu;l RNase-free水中。对RNA 的完整性和纯度进行鉴定，所提取RNA于?80°C冻存或进行逆转录反应。 cDNA的合成 CDNA合成按逆转录试剂盒(四川天泽生物工程有限公司)说明书操作 步骤进行。反应体系20mu;l,包括总RNA3mu;g,随机六合引物 (0.2mu;g/mu;l)/oligo (dT) 18(0.5mu;g/mu;l) 1 mu;l, RNase-free 水至 12mu;lo 70°C水浴5分钟,置冰上，加5times;逆转录缓冲液4mu;l, RNA酶 抑制剂(40U/mu;l)lmu;l, dNTP 2mu;l, 37°C水浴 5 分钟，置冰上，力H AMV 逆转录酶lmu;l(200U),反应终体积为20mu;L 42°C水浴60分钟，再70°C水 浴10分钟终止反应，然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模 板使用，不