课件：中药鉴定学.ppt

* * * * * 理化鉴定的常用方法 理化鉴定法按照所采用的手段不同，一般可分为物理常数测定法、微量升华法、电泳分析法、化学定性分析法、化学定量分析法、分光光度法（紫外、可见、红外、荧光、原子吸收）、色谱鉴定法、磁共振光谱鉴定法、质谱鉴定法、色谱光谱联用、X射线衍射鉴定法、热分析、聚类分析法等，其中多数方法不但可以用于品种鉴定，也可以用于质量控制。 * * 五、生物鉴定法 生物鉴定（bioassay）法又称“生物检定”或“生物测定法”。 是利用中药或其所含的化合物对生物体（organism）的作用强度，以及用DNA特异性遗传标记特征和基因表达差异等来鉴别中药的品种和质量的一种方法。 通常分为生物效应鉴定法和基因鉴定法两大类。 * * 生物效应鉴定法是利用药物对于生物(整体或离体组织)所起的作用，测定药物生物活性(biological activity)强度或药理作用，以鉴别中药真伪优劣的方法。该法以药理作用和分子生物学为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验方法和病理模型，通过被测物与相应的对照品在一定条件下比较其产生特定生物反应的剂量比例，测出药物的活性作用。 常用的方法有免疫鉴定法、细胞生物学鉴定法、药物效价测定法和单纯指标测定法等。 基因鉴定法包括DNA（deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸）遗传标记鉴定法和mRNA（messenger ribonucleic acid，信使RNA）差异显示鉴定法等。 * * （一） 免疫鉴定法 免疫鉴定法是利用中药含有的特异蛋白为抗原制备的特异抗体，与供试品中特异抗原结合产生沉淀反应的一种方法。它是通过制备特异抗原试剂，采用免疫电泳(immunoelectrophoresis)或琼脂免疫扩散等方法达到鉴定目的的。本方法具有特异性强的特点，可以准确地进行中药的品种鉴别。 * * （二） 细胞生物学鉴定法 细胞生物学鉴定法主要是采用染色体（chromosome）的分类技术对中药进行鉴定。中药某个特定种群的生物体细胞中染色体的形态、组型、带型是稳定不变的，代表着该种群的基本遗传特征，根据该特征即可以鉴定中药的品种。由于染色体形态只能在细胞分裂的中、后期观察，故本方法只适用于果实和种子类中药的鉴定。本法根据染色体的排列，制成核型模式图；或用“不对称核型分类”标准确定其核型，并与染色体的背景资料比较，达到鉴定的目的。如对中药栀子的鉴别。 * * （三） 生物效价测定法 生物效价测定（estimation of biological potency）法就是测定药物对生物机体某方面作用的强度。如黄连、黄柏、黄芩等具清热功效中药的抑菌率或抗菌效价(titer)的测定，对洋地黄强心指标生物效价的测定等。药物效价测定法，也叫生物检定或生物测定法。换言之，是利用生物体的反应来鉴定中药有效成分的含量或效价，测定药物的疗效和毒性（toxicity）的方法。 ? * * 生物效价测定法 有些中药，如洋地黄及其制剂、铃兰毒苷及其注射液，到目前为止还没有找到一种比较合适的化学分析方法来确定它们的有效成分含量或效价。所以，就宜用生物检定法进行效价测定。生物检定法的主要原则是将供试品与对照品(包括中药，纯成分)在严格规定的条件下，比较它们对生物体所产生的反应强度，再计算出中药或其制剂的剂量标准。中药的效价通常以1g中药中所具有的“作用单位”数来表示。这种单位是指在一定条件下所表现一定生理作用的最小剂量。 * * 生物效价 例如，《中国药典》规定洋地黄制剂的质量标准：洋地黄叶(Folium Digitalis)要保证同样洋地黄制剂的各种商品的效价一致，而并不是为了使不同的精制强心苷效价相等。因为这种方法不能把它在肠内吸收的差别、作用的快慢以及效力的久暂等估计在内。鉴于现时尚缺乏可靠的定量法，故可利用动物试验以检定药物的效力。此种生物检定法包括蛙法、猫法、豚鼠法及鸽法等。 * * （四）纯指标测定法 单纯指标测定法就是测定某药物或某类药物某一特性或某一药理作用的强弱。如对含皂苷类中药溶血指数的测定，如使用溶血法鉴定柴胡和大叶柴胡；对含苦味中药苦味指数的测定；对含蒽醌类大黄的泻下作用的测定；对青黛中靛玉红、两头尖中竹节香附素A的抗癌活性的测定；黄芪中黄芪皂苷甲、三七中三七皂苷降血压和扩张血管作用的测定；对人参中人参多糖，刺五加根中刺五加多糖和红花多糖的免疫作用的测定；对三七抗凝血作用的测定等。 * * （五）DNA遗传标记鉴定法 DNA分子是由G、A、C、T 4种碱基（base pairs）构成，为双螺旋结构的长链分子，生物体特定的遗传信息便包含在特定的碱基排列序列中，遗传上的差异便表现在4种碱基排列顺序的变化之中，这就是生物的遗传多样性。比较物种间DNA分子的遗传多样